本发明涉及式(I)化合物,其中R
1.一种式(I)的咪唑衍生物:ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>和其酸加成盐,其中:R₁和R₂各自为氢;Q选自:直接键、C(O)、SO₂、CONH、C(O)(CH₂)_n、(CH₂)_n(O)或(CH₂)_n,其中n为0、1或2;Z是从以下基团选出的基团:ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>p为1;q为0、1或2;虚线表示R₈和/或R₉可在苯并噻吩环上的任一位置;R₃和R₈中的一者为羟基、氰基、(C₁-C₆)烷氧基或OSO₂NR₁₀R₁₁;且另一者是氢或羟基、卤素、硝基、氰基、(C₁-C₆)烷氧基、NR₁₀R₁₁、SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀SO₂NR₁₁R₁₂;R₄是氢;且R₉是氢、羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、选自下述的酰基:甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、和戊酰基,NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、CO₂R₁₀;当Q-Z为下述基团:ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>n为0、1或2,R₃和R₈中的一者是羟基、或OSO₂NR₁₀R₁₁;R₁₀、R₁₁和R₁₂各自为氢;当Z为下述基团:ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="399"/>那么R₈和R₉连同苯环形成苯并噁噻嗪二氧化物、二氢苯并噁噻嗪二氧化物、或苯并噁噻唑二氧化物。
2.如权利要求1所述的衍生物和其酸加成盐,其中:R₃和R₈中的一者为氰基;和另一者是氢或羟基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷氧基、NR₁₀R₁₁、SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基。
3.如权利要求1所述的衍生物和其酸加成盐,其中:R₉是氢或羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、CO₂R₁₀、CHO、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁。
4.如权利要求3所述的衍生物和其酸加成盐,其中:R₉为羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、CO₂R₁₀、CHO或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁。
5.如权利要求1至4中任一权利要求所述的衍生物和其酸加成盐,其中:R₈为氢、羟基、卤素、硝基、氰基、(C₁-C₆)烷氧基、NR₁₀R₁₁、SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁或OSO₂NR₁₀SO₂NR₁₁R₁₂基;R₉为氢或羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、CHO、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基;p和q是如权利要求1所定义。
6.如权利要求1所述的衍生物和其酸加成盐,其中:Z为ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="384"/>其中R₈、R₉、和p是如权利要求1所定义。
7.如权利要求6所述的衍生物和其酸加成盐,其中:Z是ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="372"/>Q为(CH₂)_n,其中n为0、1或2;R₈为羟基、卤素、硝基、氰基或(C₁-C₆)烷氧基、NR₁₀R₁₁、SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基;R₉为氢、羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁;p是如权利要求1所定义。
8.如权利要求6至7中任一权利要求所述的衍生物和其酸加成盐,其中:n为0或1;R₁、R₂和R₄各自为氢;R₉为氢、卤素、(C₁-C₆)烷基或OSO₂NR₁₀R₁₁。
9.如权利要求6至7中任一权利要求所述的衍生物和其酸加成盐,其中R₃和R₈中的一者为羟基、氰基或OSO₂NR₁₀R₁₁,而另一个为羟基、硝基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁。
10.如权利要求9所述的衍生物和其酸加成盐,其中R₃和R₈中的一者为氰基或OSO₂NR₁₀R₁₁,而另一个为羟基或OSO₂NR₁₀R₁₁。
11.如权利要求1所述的衍生物和其酸加成盐,其中:Z为ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="654"/>其中R₈、R₉、和p是如权利要求1所定义;所述虚线表示R₈和/或R₉可在所述苯并噻吩环的任何位置上。
12.如权利要求11所述的衍生物和其酸加成盐,其中R₈为OSO₂NR₁₀R₁₁或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁。
13.如权利要求11或12所述的衍生物,其中R₉为氢、卤素、硝基、COOR₁₀或氰基。
14.如权利要求11或12所述的衍生物,其中Q为(CH₂)_m-X-(CH₂)_n-A,其中m为0、1或2且X为直接键、SO₂或CO,n为0且A为直接键。
15.如权利要求11或12所述的衍生物,其中R₃为氢、卤素或氰基。
16.如权利要求1所述的衍生物和其酸加成盐,其中:Z为下式基团:ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="393"/>其中R₈、R₉和p是如权利要求1所定义。
17.一种医药组合物,其包含如权利要求1-4、6-7、11-12和16中任一权利要求所述的衍生物或其医药学上可接受的酸加成盐、和医药学上可接受的载剂。
18.如权利要求17所述的医药组合物,其包含0.1到400mg的所述衍生物。技术领域
本发明涉及1-N-苯基-氨基-1H-咪唑衍生物和含有它们的医药组合物。xa0本发明大体来说涉及激素和非激素依赖性癌症与内分泌失调症的领域。xa0
背景技术
芳香酶是负责诸如雄烯二酮或睾丸激素的雄激素分别特异转化成诸如雌酮和雌二醇的雌激素的生理酶(Simpsonxa0ER等人,Endocrinexa0Reviews,1994,15:342-355)。因此抑制芳香酶是干扰正常或病理雌激素诱导性或雌激素依赖性生物过程的选择策略,所述生物过程诸如雌性性别分化、排卵、着床、受孕、乳汁分泌和子宫内膜细胞增殖;以及是调节雄体内精子产生或前列腺细胞增殖或是调节诸如骨骼形成或免疫T细胞和细胞激素平衡的非生殖功能的选择策略(见Simpsonxa0ER等人,Recentxa0Progressxa0inxa0HormoneResearch,1997,52:185-213和全期的Endocrinexa0Relatedxa0Cancer(1999,第6卷,n°2)和Breastxa0Cancerxa0Researchxa0Treatment(1998,第49卷,增刊n°1))。xa0硫酸雌酮经酶类固醇硫酸酯酶(E.C.3.1.6.2.,STS)催化水解成雌酮,和硫酸DHEA经其催化水解成DHEA(Dibbeltxa0L,Biol.Chem,Hoppe-Seyler,1991,372,173-185和Steinxa0C,J.Biol.Chem.,1989,264,13865-13872)。xa0关于从充裕的硫酸雌酮(E₁S)循环池中局部组织内形成雌激素,类固醇硫酸酯酶途径已成为乳癌情形中近期关注的焦点(Pasqualinixa0JR,J.Steroidxa0Biochem.Mol.Biol.,1999,69,287-292和Purohitxa0A,Mol.Cell.Endocrinol.,2001,171,129-135)。xa0抑制这种酶会防止E₁S产生游离雌酮(E₁),雌酮(E₁)经酶还原可转化成雌二醇(E₂)。除雌酮硫酸酯酶途径外,现在认为另一种有效的雌激素(DHEA-S水解后从DHEA获得的雄烯二醇(adiol))可能是支援激素依赖性乳房肿瘤的生长和发育的另一重要贡献者。xa0将雌激素在女性中的形成示意性地表示在图1中。xa0当前在患有激素依赖性癌症的患者中使用芳香酶抑制剂来防止雌激素合成。然而,临床试验表明对于患有雌激素受体阳性肿瘤的患者来说相对缺乏功效(Castiglione-Gertschxa0M,Eur.J.Cancer,1996,32A,393-395和Jonatxa0W,Eur.J.Cancer,1996,32A,404-412)。作为说明,类固醇硫酸酯酶途径可为乳房肿瘤中雌激素形成的另一重要途径。xa0EMATE(Ahmedxa0S,Curr.Med.Chem.,2002,9,2,263-273),即雌酮-3-氨基磺酸酯,是历史上的标准类固醇硫酸酯酶抑制剂,但由于其抑制机理而具有作为雌激素的严重缺点:在酶失活过程中氨基磺酸酯部分裂解,不是从E₁S而是从EMATE自身释放E₁xa0(Ahmedxa0S,J.Steroidxa0Biochem.Mol.Biol.,2002,80,429-440)。xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="551"/>雌二醇xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>已提出其他释放衍生物而无雌激素特性的非类固醇氨基磺酸酯化合物作为可接受的候选药物,诸如6,6,7-COUMATE,即一种来自文献的标准非雌激素硫酸酯酶抑制剂(Purohitxa0A,Cancerxa0Res,2000,60,3394-3396)。xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>人类碳酸酐酶催化二氧化碳(CO₂)与碳酸氢根离子(HCO₃^-)之间的转化,并且与生理和病理过程有关。其包括表达这些对传统化学/放射疗法抑制剂较少响应的酶的激素依赖性和非激素依赖性癌变、转移入侵过程和缺氧肿瘤。尤其是发现EMATE具有与乙酰唑胺(acetazolamide)相似的人类碳酸酐酶抑制效能,其中乙酰唑胺是一种已熟知的磺酰胺人类碳酸酐酶抑制剂(Winumxa0J等人,J.Med.Chem.2003,46,2197-2204)。xa0因此尤其关注具有具有下述活性的至少一个、优选至少两个的化合物:芳香酶抑制作用、类固醇硫酸酯酶抑制作用和碳酸酐酶抑制作用。xa0最近,B.Potter等人(J.Med.Chem.,46,2003,3193-3196)报道,芳香酶抑制剂YMxa0511的氨磺酰基化衍生物抑制JEG-3细胞中的碳酸酯酶和芳香酶活性。xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="666"/>所提供的适用于治疗雌激素依赖性疾病的化合物描述于USxa02003/0008862A中。具有抗芳香酶特性的咪唑衍生物描述于WOxa02004/054983中。xa0现已发现含有1-N-苯基氨基的咪唑衍生物,经证明其在芳香酶与/或类固醇硫酸酯酶与/或碳酸酐酶的抑制上具有出乎意料的高效能。xa0
发明内容
因此,本发明的一个目的在于提供1-N-苯基氨基-1H-咪唑衍生物,其为有效的芳香酶与/或类固醇硫酸酯酶与/或碳酸酐酶抑制剂。xa0本发明的另一目的在于提供含有如下文所描述的活性成份1-N-芳基氨基-1H-咪唑衍生物的医药组合物。xa0本发明的又一目的在于提供1-N-苯基氨基-1H-咪唑衍生物在制造用于治疗或预防各种疾病和用于控制女性、男性以及雌性和雄性野生或家养动物的生殖功能的药剂中的用途。xa0由如下通式(I)表示本发明的1-N-苯基氨基-1H-咪唑衍生物:xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>和其酸加成盐与立体异构形式,其中:xa0·R₁和R₂各自独立为氢、(C₁-C₆)烷基或(C₃-C₈)环烷基,或R₁与R₂一起形成饱和或xa0不饱和5、6或7元碳环;xa0·Q为(CH₂)_m-X-(CH₂)_n-A;xa0·A为直接键、O、S、SO、SO₂、NR₅;xa0·X为直接键、CF₂、O、S、SO、SO₂、C(O)、NR₅或CR₆R₇;xa0·Z是从以下基团中选出的基团:xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>·m和n各自独立为0、1、2、3或4;xa0·p为1、2、3或4;xa0·q为0、1或2;xa0·虚线表示R₈和/或R₉可在苯并噻吩环上的任一位置;xa0·R₃和R₈各自独立为氢或羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、(C₁-C₆)烷硫基、(C₁-C₆)烷基磺酰基、酰基、(C₁-C₆)烷氧基羰基、甲酰胺基、OPO(OR₁₀)₂、NR₁₀R₁₁、SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂OR₁₀、SO₂OR₁₀、SSO₂NR₁₀R₁₁、CF₂SO₂OR₁₀、CF₂SO₂NR₁₀R₁₁、CF₂-四唑基或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、CO₂R₁₀、CONR₁₀R₁₁、OCHO、OCONR₁₀R₁₁、OCSNR₁₀R₁₁、SCONR₁₀R₁₁、SCSNR₁₀R₁₁、四唑基、NR₁₂CONR₁₀R₁₁、NR₁₀-CHO基;xa0·当Q-Z为下述基团:xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="568"/>n为0、1或2,而且p为1时,R₃和R₈中的一者是羟基、硝基、OPO(OR₁₀)₂、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂OR₁₀、SO₂OR₁₀、SSO₂R₁₀R₁₁、CF₂SO₂OR₁₀、CF₂SO₂NR₁₀R11、CF₂-四唑基、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀SO₂NR₁₁R₁₂、CO₂R₁₀、CONR₁₀R₁₁、OCHO、OCONR₁₀R₁₁、OCSNR₁₀R₁₁、SCONR₁₀R₁₁、SCSNR₁₀R₁₁、四唑基、NR₁₂CONR₁₀R₁₁、NR₁₀-CHO基,而另一者是氢或羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、(C₁-C₆)烷硫基、(C₁-C₆)烷基磺酰基、酰基、(C₁-C₆)烷氧基羰基、甲酰胺基、NR₁₀R₁₁、SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂OR₁₀、SO₂OR₁₀、SSO₂NR₁₀R₁₁、CF₂SO₂OR₁₀、CF₂SO₂NR₁₀R₁₁、CF₂-四唑基、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、CO₂R₁₀、CONR₁₀R₁₁、OCHO、OCONR₁₀R₁₁、OCSNR₁₀R₁₁、SCONR₁₀R₁₁、SCSNR₁₀R₁₁、四唑基、NR₁₂CONR₁₀R₁₁、NR₁₀-CHO基;xa0·R₄和R₉各自独立为氢或羟基、氰基、卤素、硝基、OPO(OR₁₀)₂、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、(C₁-C₆)烷硫基、(C₁-C₆)烷基磺酰基、酰基、(C₁-C₆)烷氧基羰基、甲酰胺基、NR₁₀R₁₁、SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂OR₁₀、SO₂OR₁₀、SSO₂NR₁₀R₁₁、CF₂SO₂OR₁₀、CF₂SO₂NR₁₀R₁₁、CF₂-四唑基、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、CO₂R₁₀、CHO、CONR₁₀R₁₁、OCHO、OCONR₁₀R₁₁、OCSNR₁₀R₁₁、SCONR₁₀R₁₁、SCSNR₁₀R₁₁、四唑基、NR₁₂CONR₁₀R₁₁、NR₁₀-CHO基;xa0·当p为2、3或4时,诸R₉可相同或不同;xa0·R₆和R₇各自独立为氢、卤素、(C₁-C₆)烷基或(C₃-C₈)环烷基;xa0·R₂、R₁₀、R₁₁和R₁₂各自独立为氢、羟基、(C₁-C₆)烷基或(C₃-C₈)环烷基;R₁₀也可为盐;R₁₀和R₁₁也可连同两者所连接的氮原子形成含有1或2个从O、S和N选出的杂原子的5到7元杂环;xa0·当Z为下述基团,而且p为1时:xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="398"/>那么R₈和R₉也可连同苯环形成苯并噁噻嗪二氧化物、二氢苯并噁噻嗪二氧化物、苯并噁噻嗪酮二氧化物、苯并噁噻唑二氧化物、苯并噁二噻二嗪四氧化物、苯并二噻嗪四xa0氧化物或苯并二噁二噻烷四氧化物;xa0·当z为如下基团时:xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="340"/>R₃和R₄也可连同具有两者的苯环形成苯并呋喃或N-甲基苯并三唑,但是当p为1,而且Q为(CH₂)_n时,那么R₈和R₉各自独立为羟基、硝基、OPO(OR₁₀)₂、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂OR₁₀、SO₂OR₁₀、SSO₂NR₁₀R₁₁、CF₂SO₂OR₁₀、CF₂SO₂NR₁₀R₁₁、CF₂-四唑基、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、CO₂R₁₀、CONR₁₀R₁₁、OCHO、OCONR₁₀R₁₁、OCSNR₁₀R₁₁、SCONR₁₀R₁₁、SCSNR₁₀R₁₁、四唑基、NR₁₂CONR₁₀R₁₁或NR₁₀-CHO基。xa0当本发明化合物的加成盐或其立体异构形式存在时,本发明也涉及这些加成盐和立体异构形式。xa0附图说明图1表示女性中雌激素的形成。xa0具体实施方式在说明书和权利要求书中,术语“(C₁-C₆)烷基”应理解为表示具有1到6个碳原子的直链或支链烃链。(C₁-C₆)烷基是(例如)甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基或己基。优选的烷基是那些具有1、2或3个碳原子的烷基。xa0术语“卤素”应理解为表示氯、溴、碘或氟原子。xa0术语“(C₃-C₈)环烷基”应理解为表示具有3到8个碳原子的饱和单环烃。(C₃-C₈)环烷基是(例如)环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基或环辛基。xa0术语“(C₁-C₆)烷氧基”应理解为表示基团OR,其中R是如上文所定义的(C₁-C₆)烷基。(C₁-C₆)烷氧基是(例如)甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基或异戊氧基。优选的烷氧基是那些具有1、2或3个碳原子的烷氧基。xa0术语“酰基”应理解为表示基团xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="102"/>其中R′是氢或(C₁-C₄)烷基,其中术语“烷基”如上文所定义。酰基是(例如)甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基或戊酰基。优选的酰基是甲酰基和乙酰基。xa0在R₁₀的定义中,“盐”应理解为表示碱金属盐或碱土金属盐,诸如钠、钾、镁或钙盐,或以铵或以诸如三乙胺、乙醇胺或三-(2-羟乙基)胺的有机胺形成的盐。在本发明的上下文中,此适用于具有OR₁₀部分的基团。xa05到7元杂环可以是饱和或不饱和的,且包括(例如)四唑、三唑、吡唑、吡唑烷、咪唑、咪唑啶、哌啶、哌嗪、吗啉、吡咯烷。xa0式(I)化合物(例如)与无机酸形成酸加成盐,所述无机酸为诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸和类似酸;或与有机羧酸形成酸加成盐,所述有机羧酸为诸如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、反丁烯二酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸和类似酸。尤其优选的是那些医药学上可接受的盐。xa0在式(I)化合物中,优选那些满足以下条件中至少一个的化合物:xa0·R₃和R₈各自独立为氢或羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、(C₁-C₆)烷硫基、(C₁-C₆)烷基磺酰基、酰基、(C₁-C₆)烷氧基羰基、甲酰胺基、NR₁₀R₁₁、SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、OCHO、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基;xa0·R₄和R₉各自独立为氢或羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、(C₁-C₆)烷硫基、(C₁-C₆)烷基磺酰基、酰基、(C₁-C₆)烷氧基羰基、甲酰胺基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、CO₂R₁₀、CHO、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基;xa0·R₁和R₂各自独立为氢或(C₁-C₆)烷基;xa0·R₁₀、R₁₁和R₁₂各自独立为氢或(C₁-C₆)烷基。xa0尤其优选那些满足以下条件的式(I)化合物,其中:xa0·R₃和R₈中的一者是羟基、硝基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基;和xa0·另一者是氢或羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、(C₁-C₆)烷硫基、(C₁-C₆)烷基磺酰基、酰基、(C₁-C₆)烷氧基羰基、甲酰胺基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基。xa0这些化合物中尤其优选群组是满足以下条件的化合物,其中:xa0·R₃和R₈中的一者是羟基、氰基、(C₁-C₆)烷氧基或OSO₂NR₁₀R₁₁、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁;和xa0·另一者是氢或羟基、卤素、硝基、氰基、(C₁-C₆)烷氧基、NR₁₀R₁₁、SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀SO₂R₁₁R₁₂基。xa0式(I)化合物优选地是满足以下条件的化合物,其中:xa0·R₃和R₈中的一者是氰基;和xa0·另一者是氢或羟基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、NR₁₀R₁₁、SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基。xa0进一步优选的化合物是满足以下条件的化合物,其中:xa0·R₄和R₉中的一者是氢或羟基、氰基、OSO₂NR₁₀R₁₁基;和xa0·另一者是氢或羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、CO₂R₁₀、CHO、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基。xa0优选化合物的另一群组是满足以下条件的化合物,其中:xa0·R₄是氢、羟基、氰基或OSO₂NR₁₀R₁₁;xa0·R₉是氢或羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、CO₂R₁₀、CHO基;xa0尤其优选的式(I)化合物是满足以下条件的化合物,其中:xa0·R₄是氢;和xa0·R₉是羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、CO₂R₁₀、CHO或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基。xa0尤其优选的式(I)化合物是满足以下条件的化合物,其中Z是:xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>其中R₈和R₉是如上文所定义。xa0在上文所定义的化合物中,R₈和R₉优选为如下:xa0·R₈是氢、羟基、卤素、硝基、氰基、(C₁-C₆)烷氧基、NR₁₀R₁₁、SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁或OSO₂NR₁₀SO₂NR₁₁R₁₂基;xa0·R₉是氢或羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、CO₂R₁₀、CHO、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基;xa0·p和q如上文所定义。xa0在式(I)化合物中,也尤其优选的是其中Q是从直接键、C(O)、SO₂、CONH、C(O)(CH₂)_n、(CH₂)_n(O)或(CH₂)_n选出(其中n是0、1或2)的化合物。xa0尤其优选的是式(II)的化合物xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>其中:xa0·Q是(CH₂)_n,其中n是0、1或2;xa0·R₃和R₈中的一者是羟基、硝基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基,而另一者是氢或羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₃)烷氧基、三氟甲基、(C₁-C₆)烷硫基、(C₁-C₆)烷基磺酰基、酰基、(C₁-C₆)烷氧基羰基、甲酰胺基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基;xa0·R₄和R₉各自独立地为氢、羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、(C₁-C₆)烷硫基、(C₁-C₆)烷基磺酰基、酰基、(C₁-C₆)烷氧基羰基、甲酰胺基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基;xa0·R₁₀和R₁₁各自独立地为氢、(C₁-C₆)烷基或(C₃-C₈)环烷基;xa0·p为1、2、3或4;xa0·R₈和R₉也可连同具有其两者的苯环形成苯并恶噻嗪二氧化物或二氢苯并恶噻嗪二氧化物;xa0·R₃和R₄也可连同具有其两者的苯环形成苯并呋喃或N-甲基苯并三唑。xa0在这些式(II)化合物中,优选那些满足以下条件中的至少一个的化合物:xa0·Q为(CH₂)_n,其中n为0、1或2;xa0·R₈为羟基、卤素、硝基、氰基或(C₁-C₆)烷氧基、NR₁₀R₁₁、SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁xa0或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁基;xa0·R₉为氢、羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁;xa0·p为1、2、3或4。xa0最优选式(II)化合物是那些满足下列条件的化合物,其中:xa0·n为0或1;xa0·R₁和R₂各自独立地为氢或(C₁-C₆)烷基;xa0·R₄和R₉各自独立地为氢、卤素、(C₁-C₆)烷氧基、酰基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁。xa0尤其优选的式(II)化合物是那些满足下列条件的化合物,其中:xa0·n为0或1;xa0·R₁、R₂和R₄各自为氢;xa0·R₉为氢、卤素、(C₁-C₆)烷氧基或OSO₂NR₁₀R₁₁。xa0尤其优选的式(II)化合物是那些满足下列条件的化合物,其中:xa0·n和p是1;xa0·R₈为羟基、卤素、硝基、氰基或(C₁-C₆)烷氧基、NR₁₀R₁₁、SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁或OSO₂NR₁₀SO₂NR₁₁R₁₂基;xa0·R₉为羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、三氟甲基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、CO₂R₁₀或CHO基;xa0·R₃为氰基、羟基、OSO₂NR₁₀R₁₁或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁;xa0·R₄为氢、羟基、卤素、氰基或OSO₂NR₁₀R₁₁。xa0在这些化合物中,也优选那些满足下列条件中的至少一个的化合物:xa0·R₃和R₈中的一者为羟基、氰基或OSO₂NR₁₀R₁₁,优选氰基或OSO₂NR₁₀R₁₁;和xa0·另一者为羟基、硝基、NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁,优选羟基或OSO₂NR₁₀R₁₁。xa0在这些式(II)化合物中,最优选其中R₁₀和R₁₁为氢的那些化合物。xa0也尤其优选式(III)的化合物:xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>其中:xa0·Q为(CH₂)_m-X-(CH₂)_n-A-;xa0·A为直接键或O、S、SO、SO₂、NR₅;xa0·X为直接键、CF₂、O、S、SO、SO₂、C(O)、NR₅或CR₆R₇;xa0·m和n各自独立地为0、1、2、3或4;xa0·R₅、R₄、R₈和R₉各自独立地为氢或羟基、氰基、卤素、硝基、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、苄氧基、三氟甲基、(C₁-C₆)烷硫基、(C₁-C₆)烷基磺酰基、酰基、(C₁-C₆)烷氧基羰基、NR₁₀R₁₁、OPO(OR₁₀)₂、OCHO、COOR₁₀、SO₂NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁、SO₂OR₁₀、OSO₂OR₁₀、SSO₂NR₁₀R₁₁、CONR₁₀R₁₁、OCONR₁₀R₁₁、OCSNR₁₀R₁₁、SCONR₁₀R₁₁、SCSNR₁₀R₁₁、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、四唑基、NR₁₀CONR₁₁OH、NR₁₀SO₂NR₁₁OH、NOH-CHO、NOHSO₂NR₁₀R₁₁或OSO₂NR₁₀OH基;xa0·p为0、1或2;xa0·R₅、R₆、R₇、R₁₀、R₁₁和R₁₂各自独立地为氢、(C₁-C₆)烷基或(C₃-C₈)环烷基;R₁₀也可为盐;R₁₀和R₁₁也可连同其两者所连接的氮原子形成含有一或两个从O、S和N选出的杂原子的5到7元杂环;xa0·虚线表示Q和/或R₈和/或R₉可在苯并噻吩环的任何位置上。xa0在式(III)化合物中,也优选那些满足下列条件中的至少一个的化合物:xa0·R₃为氢、卤素或氰基;xa0·R₈为OSO₂NR₁₀R₁₁或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁;xa0·R₉为氢、卤素、硝基、COOR₁₀或氰基;xa0·R₄为氢、卤素、氰基、(C₁-C₆)烷氧基、-NR₁₀R₁₁、OSO₂NR₁₀R₁₁或NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁;xa0·R₁₀、R₁₁和R₁₂各自独立地为氢或(C₁-C₆)烷基。xa0也优选以下式(III)化合物:其中Q为(CH₂)_m-X-(CH₂)_n-A,其中m为0、1或2且X为直接键、SO₂或CO,n为0且A为直接键。xa0尤其优选式(IV)的化合物:xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>其中R₁、R₂、R₃、R₄、R₈、R₉和p如式(I)化合物所定义。xa0尤其优选的式(IV)化合物是那些满足下列条件的化合物,其中:xa0·R₃为氰基或OSO₂NR₁₀R₁₁;xa0·R₄为氢、羟基、卤素、氰基、OSO₂NR₁₀R₁₁;xa0·R₈为羟基、氰基、OSO₂NR₁₀R₁₁、NR₁₀R₁₁、NR₁₂SO₂NR₁₀R₁₁、OCHO、四唑基;xa0·R₉为氢、卤素、硝基、氰基或CO₂R₁₀;和xa0·Q如上文对式(I)化合物所定义。xa0由于本发明化合物能够抑制酶芳香酶和/或类固醇硫酸酯酶和/或碳酸酐酶,因此其可单独或结合其他活性成份使用,以治疗或预防人类以及野生或家养动物中的任何激素依赖性或非激素依赖性癌症。本发明的化合物因其芳香酶和/或类固醇硫酸酯酶抑制活性而适用于控制人类以及野生或家养动物中由雌激素调节的生殖功能。xa0在治疗或预防上述病症时,本发明的化合物可单独使用或结合抗雌激素、SERM(选择性雌激素受体调节剂)、芳香酶抑制剂、碳酸酐酶抑制剂、抗雄激素、类固醇硫酸酯酶抑制剂、裂解酶抑制剂、黄体酮或LH-RH激动剂或拮抗剂使用。本发明的化合物也可结合下列各物使用:放射治疗剂;化学治疗剂,诸如氮化芥类似物,如环磷酰胺、美法仑(melphalan)、异环磷酰胺或氯乙环磷酰胺(trophosphamide);次乙亚胺(ethylenimine),如塞替派(thiotepa);亚硝基脲,如卡氮芥(carmustine);溶解剂,如替莫唑胺(temozolomide)或达卡巴嗪(dacarbazine);叶酸抗代谢药,如甲胺喋呤(methotrexate)或雷替曲塞(raltitrexed);嘌呤类似物,如硫鸟嘌呤(thioguanine)、克拉屈滨(cladribine)或氟达拉滨(fludarabine);嘧啶类似物,如氟尿嘧啶(fluorouracil)、喃氟啶(tegafur)或吉西他滨(gemcitabine);长春花生物碱或类似物,如长春碱、长春新碱或长春瑞宾(vinorelbine);鬼臼毒素(podophyllotoxin)衍生物,如依托泊苷(etoposide)、紫杉烷类(taxane)、欧洲紫杉醇(docetaxel)或太平洋紫杉醇(paclitaxel);小红莓(anthracycline)或类似物,如羟道诺红霉素(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、黄胆素(idarubicin)或米托蒽醌(mitoxantrone);细胞毒素抗生素,如博莱霉素(bleomycin)或丝裂霉素(mitomycin);铂化合物,如顺铂(dsplatin)、卡波铂(carboplatin)或奥赛力铂(oxaliplatin);单克隆抗体,如利妥昔单抗(rituximab);抗肿瘤剂,如喷司他丁(pentostatin)、米替福新(miltefosine)、雌莫司汀(estramustine)、拓朴替康(topotecan)、伊立替康(irinotecan)或必卡他酰胺(bicalutamide);或结合前列腺素抑制剂(COXxa02/COXxa01抑制剂)使用。xa0本发明的化合物也可单独或结合一种或数种诸如LH-RH激动剂或拮抗剂、雌激素黄xa0体酮(estroprogestative)避孕药、黄体酮、抗黄体酮或前列腺素抑制剂的其他治疗剂使用,用于控制人类以及野生或家养动物物种中由雌激素调节的生殖机能,诸如雄性或雌性繁殖、妊娠、流产或分娩。xa0乳房组织是经雌激素刺激的增殖和/或分化的敏感靶位,芳香酶和/或类固醇硫酸酯酶和/或碳酸酐酶的抑制剂可用于治疗或预防女性良性乳房疾病、男性乳房发育症和男性与女性或雄性或雌性家养动物的转移性或非转移性良性或恶性乳房肿瘤。本发明的化合物也可用于治疗或预防良性或恶性子宫或卵巢疾病。在各种情况中,本发明的化合物可单独使用,或结合一种或数种诸如抗雄激素、抗雌激素、黄体酮或LH-RH激动剂或拮抗剂的其他性内分泌治疗剂使用。xa0由于酶类固醇硫酸酯酶将硫酸DHEA转化成DHEA,即活性雄激素(睾丸激素和二氢睾丸激素)的前驱体,因此本发明的化合物可单独使用,或结合一种或数种诸如抗雄激素、抗雌激素、SERM、抗芳香酶、黄体酮、裂解酶抑制剂或LH-RH激动剂或拮抗剂的其他性内分泌治疗剂使用,以用于治疗或预防雄激素依赖性疾病,诸如雄激素性脱发(雄性型脱发)(Hoffmanxa0R等人,J.Invest.Dermatol.,2001,117,1342-1348)、多毛症、痤疮(Billichxa0A等人,WOxa09952890)、良性或恶性前列腺或睪丸疾病(Reedxa0MJ,Rev.Endocr.Relat.Cancer,1993,45,51-62)。xa0由于类固醇硫酸酯酶抑制剂能够增强大鼠的学习和空间记忆力(Johnsonxa0DA,BrainRes,2000,865,286-290),因此其也潜在地与认知功能障碍的治疗相关。作为神经类固醇,硫酸DHEA会影响包括那些涉及乙酰胆碱、谷氨酸酯和GABA的多种神经递质系统,由此导致神经元兴奋性增加(Wolfxa0OT,Brainxa0Res.Rev,1999,30,264-288)。因此,本发明的化合物也适用于通过增加中枢神经系统中的DHEA含量来增强认知功能,尤其适用于治疗老年痴呆症,包括阿尔茨海默氏病。xa0此外,雌激素与Th₁和Th₂主要免疫功能之间的平衡调节有关,并因此可适用于治疗或预防性别依赖性自身免疫病,诸如狼疮、多发性硬化、类风湿性关节炎和类似疾病(Daynesxa0RA,J.Exp.Med,1990,171,979-996)。类固醇硫酸酯酶抑制作用在啮齿动物接触过敏和胶原蛋白诱发性关节炎的模型中进一步显示出保护性(Suittersxa0AJ,Immunology,1997,91,314-321)。xa0使用2-MeOEMATE进行的研究表明,类固醇硫酸酯酶抑制剂具有有效的非雌二醇依赖性生长抑制作用(MacCarthy-Mooroghxa0L,Cancerxa0Research,2000,60,5441-5450)。使用本发明化合物可以惊奇地观察到肿瘤体积减小,其伴随有低肿瘤类固醇硫酸酯酶抑制作用。鉴于这一点,本发明化合物可能会因癌细胞中的这些新颖化学实体与微管网状xa0物之间的强交互作用而导致细胞分裂的减少,而不考虑所述组织(包括乳房、子宫内膜、子宫、前列腺、睾丸)或从其产生的转移。因此,本发明化合物可适用于治疗非雌激素依赖性癌症。xa0本发明化合物尤其有益于治疗或预防雌激素依赖性疾病或失调症(意即雌激素诱发性或雌激素刺激性疾病或)(Golobxa0T,Bioorg.Med.Chem.,2002,10,3941-3953)。xa0此外,本发明化合物是碳酸酐酶(CA)抑制剂。此特性可解释这些化合物在非激素依赖性癌症中的重要性。CAxa0II免疫组织化学研究表明其表达于恶性脑肿瘤(ParkkilaA-K.等人,Histochem.J.,1995,27:974-982)和胃与胰腺癌(Parkkilaxa0S等人,Histochem.J.,1995,27:133-138)中,且最近的证据表明CAxa0IX和XII也表达于一些肿瘤中并且可能在功能上与肿瘤形成有关。Ivanov等人(Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1998,95:12596-12601)最近假设肿瘤相关性CAxa0IX和XII可与癌细胞周围的细胞外介质的酸化有关,这将产生有益于肿瘤生长和扩散的微环境。已表明乙酰唑胺可显著地抑制四种肾脏癌细胞系的入侵能力(Parkkilaxa0S等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,2000,97:2220-2224),即一种可归于在这些细胞中表达的CAxa0II、IX和XII的作用。白血病细胞可容易地通过循环从骨髓扩散到其他器官,但各种白血病在形成髓外肿瘤(意即转移)的能力上有所不同。如果CA活性对于其他癌细胞的入侵是必要的,那么可类似地推测活性CA也可在白血病细胞中起作用。xa0如本文所用,术语“结合”是指任何关于将本发明化合物与一种或一种以上其他医药物质共同投药的方案,而不考虑这些物质中的任一种的用药时间和剂量随时间变化的性质。举例而言,共同投药可为同时用药、相继投药或隔一段时间投药。xa0为了治疗/预防任何上述疾病或失调症,本发明化合物可(例如)在含有医药学上可接受的常规无毒载剂、佐剂和媒剂的剂量单位配方中经口、局部、非经肠地投药。对于本发明化合物的投药,给出这些剂型作为实例,但其他剂型可由配方领域的技术人员来开发。如本文所用,术语非经肠包括皮下注射、静脉内、肌肉内、胸骨内注射或输液技术。除治疗人类以外,本发明化合物在诸如小鼠、大鼠、马、牛、羊、狗、猫等温血动物的治疗中也有效。xa0含有一种或一种以上活性成分的医药组合物可呈适于口服的形式,例如片剂、锭剂、含片、水性或油性悬浮液、可分散性散剂或颗粒剂、乳液、硬或软胶囊或糖浆剂或酏剂。用于口服的组合物可根据所属领域中已知的任何用于制造医药组合物的方法来制备并且这些组合物可含有一种或一种以上从由甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂组成的群组选出的试剂,以提供医药上精致和可口的制剂。片剂含有与医药学上可接受的适用于制xa0造片剂的无毒赋形剂相混合的活性成份。这些赋形剂可为(例如)下列各物:惰性稀释剂,诸如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠;成粒剂和崩解剂,例如玉米淀粉或褐藻酸;粘合剂,例如淀粉、明胶或阿拉伯胶;以及润滑剂,例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。这些片剂可以是未经包衣的或者可以通过已知技术进行包衣以延迟胃肠道中的崩解和吸收并由此提供持续较长时间的作用。举例来说,可采用诸如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯的时间延迟材料。xa0也可以通过美国专利第4,256,108、4,166,452和4,265,874号所述的技术来包衣,以形成用于受控释放的渗透治疗片剂。xa0用于口服的配方也可呈现为硬明胶胶囊,其中活性成份与惰性固体稀释剂(例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土)相混合;或可呈现为软明胶胶囊,其中活性成份与水或油性介质(例如花生油、液体石蜡或橄榄油)相混合。xa0水性悬浮液含有与适用于制造水性悬浮液的赋形剂相混合的活性成分。这些赋形剂为:悬浮剂,例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄耆胶和阿拉伯胶;分散剂或湿润剂,可为天然存在的磷脂(例如卵磷脂)或氧化烯与脂肪酸的缩合产物(例如聚氧化乙烯硬脂酸酯)或环氧乙烷与长链脂肪族醇的缩合产物(例如十七乙烯氧基鲸蜡醇(heptadecaethyleneoxycetanol))或环氧乙烷与从脂肪酸和己糖醇衍生的偏酯的缩合产物(诸如聚氧化乙烯山梨糖醇单油酸酯)或环氧乙烷与从脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的缩合产物(例如聚乙烯山梨糖醇酐单油酸酯)。水性悬浮液也可含有一种或一种以上防腐剂,例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯;一种或一种以上着色剂;一种或一种以上调味剂;和一种或一种以上甜味剂,诸如蔗糖、糖精或阿斯巴甜糖。xa0油性悬浮液可通过使活性成份悬浮于植物油(例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油)或诸如液体石蜡的矿物油中来进行调配。油性悬浮液可含有增稠剂,例如蜂蜡、硬石蜡或乙酰醇。可添加诸如上文所述的甜味剂和调味剂来提供可口的口服制剂。可通过添加诸如抗坏血酸的抗氧化剂来保存这些组合物。xa0适于通过添加水来制备水性悬浮液的分散性散剂和颗粒剂可提供与分散剂或湿润剂、悬浮剂和一种或一种以上防腐剂相混合的活性成分。由那些上文所提到的来例示适合的分散剂或湿润剂和悬浮剂。也可存在另外的赋形剂,例如甜味剂、调味剂和着色剂。本发明的医药组合物也可呈水包油乳液的形式。油相可为植物油(例如橄榄油或花生油)或矿物油(例如液体石蜡)或这些物质的混合物。适合的乳化剂可为天然存在的磷脂(例如大豆、卵磷脂)和从脂肪酸与己糖醇酐衍生的酯或偏酯(例如山梨糖醇酐单油酸酯)xa0和所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物(例如聚氧化乙烯山梨糖醇酐单油酸酯)。所述乳液也可含有甜味剂和调味剂。xa0所述医药组合物可呈无菌可注射水性或油质悬浮液的形式。可根据已知技术使用上文已提及的那些适合的分散剂或湿润剂和悬浮剂来调配此悬浮液。所述无菌可注射制剂也可为非经肠可接受的无毒稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液,例如1,3-丁二醇溶液。在可接受的媒剂和溶剂中,可采用水、林格氏(Ringer)溶液和等渗氯化钠溶液。此外,常规上采用无菌固定油来作为溶剂或悬浮介质。为了达成这个目的,可采用任何温和的固定油,包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外,诸如油酸的脂肪酸也可用在注射剂的制备中。xa0每天约0.0001mg到约20mg/kg体重的剂量水平适用于治疗上文所指示的症状,或者每个患者每天约0.1mg到约2000mg也适用。xa0可结合载剂材料来产生单一剂型的活性成份的量将依赖于所治疗的主体和特定投药模式。剂量单位形式一般含有约0.1mg到约400mg之间的本发明化合物,通常含有0.1mg、1mg、2mg、5mg、10mg、20mg、40mg、80mg、100mg、200mg或400mg本发明化合物。xa0然而,应了解任何特定患者的具体剂量水平将取决于各种因素,包括年龄、体重、整体健康状态、性别、饮食、投药时间、投药路径、排泄速率、药物组合和经受治疗的特定疾病的严重性。xa0根据另一目的,本发明涉及一种用于治疗或预防上述疾病、失调症或病症的方法。所述方法包含对需要治疗的受检者(人类或动物)投与治疗有效量的本发明化合物或其医药学上可接受的酸加成盐。xa0式(I)的1-N-芳基-氨基-1H-咪唑衍生物和其酸加成盐可遵循通用流程Ia、Ib、IIa、IIb、III、IV和V来制备,其中()_m表示(CH₂)m且()_n代表(CH₂)_n。xa0流程Iaxa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>根据流程Ia,N,N-二取代苯胺(3)可通过使用标准条件(Marchxa0J.,Advancedxa0OrganicChemistry,第四版,Wileyxa0Interscience,New-York)来缩合苯胺衍生物(1)与卤化衍生物、醇基(alcoyl)衍生物、磺酰基衍生物或亚磺酰基衍生物(2)而获得。多数卤化衍生物、醇基衍生物、磺酰基衍生物或亚磺酰基衍生物(2)是市售的或是由普通化学方法来合成的(见实验部分)。xa0使用标准条件将化合物(3)转化为其亚硝基衍生物,然而还原以提供式(4)的1,1-二取代肼。xa0或者,1,1-二取代肼(4)可通过使用由U.Lerch和J.Kntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="64"/>nig(Synthesis,1983,2,157-8)所描述的条件或由J.Chung等人(Tetrahedronxa0Letters,1992,33,4717-20)所描述的条件以式(2)化合物使式(5)的肼选择性N-烷基化而制得。xa0然后,(4)与二烷氧基-烷基-异硫氰酸酯衍生物或乙烯氧基-烷基-异氰酸酯衍生物缩合以提供氨基硫脲(6),其通过以如乙酸或硫酸的酸进行处理而转化为1-氨基-咪唑xa0-2-硫酮(7)。xa0遵循S.Grivas和E.Ronne在Actaxa0Chemicaxa0Scandinavia,1995,49,225-229中所描述的条件,乙酸中(7)的脱硫作用产生最终产物1-N-苯基-氨基-1H-咪唑(8),视情况将其转化成其酸加成盐中的一种。xa0或者,所述化合物(8)(其中R₃或R₄为吸电子基团)可通过使用标准条件(Marchxa0J.,Advancedxa0Organicxa0Chemistry,第四版,Wileyxa0Interscience,New-York)来缩合N-咪唑并苯胺(9)与卤化衍生物、醇基衍生物、磺酰基衍生物或亚磺酰基衍生物(2)而获得。xa0如果R₈为酯,那么化合物(8)的皂化作用会由普通化学方法产生羧酸衍生物。xa0如果R₈为磺酰胺,那么其可经由恰当取代的醇基衍生物或卤化衍生物(2)而直接获得。xa0如果R₈为氰基,那么与叠氮化钠反应产生四唑基(Kiyotoxa0K.,Synthesis,1998,910-14)。xa0化合物(9)是通过与上文所公开的用于从化合物(4)开始来获得化合物(8)的方法类似的方法而获得的。xa0流程Ibxa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>根据流程Ib,用三溴硼烷(McOmie.J.F.W,Tetrahedron,1968,24,2289-92)或哌啶(Nishiokaxa0H.Synthesis,200,2,243-46)或通过氢化作用(Felixxa0A.,Jxa0OrgChem,1978,43,4194-97)使甲氧基或苄氧基衍生物(8)去保护会产生羟基化合物(10)。经氯化亚锡或由钌和肼(WOxa002051821)来还原硝基化合物(8)会产生氨基化合物(12)(Matassaxa0V.,Jxa0Medxa0Chem,1990,33,2621-29)。xa0通过以氢化钠和氨磺酰氯进行处理(Nussbaumer.P,Jxa0Medxa0Chem,2002,45,4310-20)或通过在二甲基乙酰胺(DMAc)中与氨磺酰氯进行反应(Makotoxa0O,Tetrahedronletters,2000,41,7047-51)来将这些化合物转化为相应的氨基磺酸酯(11)或氨基磺酰基胺(13)。xa0这些羟基化合物可通过以甲酰基乙酸酯(Schreinerxa0E.,Bioorgxa0Medxa0Chemxa0Lett,2004,14,4999-5002)进行处理而转化为甲酸酯衍生物或通过以N,N’-羰基二咪唑(Fischer,W.,Synthesis,2002,1,29-30)进行处理而转化为1H-咪唑-1-羧酸酯衍生物。xa0在邻位上既具有氨基也具有羟基的化合物(10)或(12)可遵循由K.K.Andersen(Jxa0Orgxa0Chem,1991,56,23,6508-6516)所提出的条件转化为相应的苯并恶噻唑。xa0当X为CO或CS时,遵循标准条件(Marchxa0J.,Advancedxa0Organicxa0Chemistry,第四版,Wileyxa0Interscience,New-York)来进行酮、硫酮、酰胺、硫代酰胺的还原作用。这些还原步骤在合成过程的任何步骤都会有效。xa0流程IIaxa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="692"/>根据流程IIa,化合物(15)可通过与流程Ia中的化合物(3)相同的步骤从化合物(1)和(14)开始反应而获得或通过使用标准条件(Marchxa0J.,Advancedxa0OrganicChemistry,第四版,Wileyxa0Interscience,New-York)来缩合N-咪唑并苯胺(9)与卤化衍生物、醇基衍生物、磺酰基衍生物或亚磺酰基衍生物(14)而获得。多数卤化衍生物、醇基衍生物、磺酰基衍生物或亚磺酰基衍生物(14)可在市场上购得或通过普通化学方法合成(见实验部分)。xa0如果R₈为酯,那么化合物(15)的皂化作用通过普通化学方法产生羧酸衍生物。xa0如果R₈为磺酰胺,那么其可由经恰当取代的醇基衍生物或卤化衍生物(14)而直接获得。xa0如果R₈为氰基,那么与叠氮化钠反应产生四唑基(Kiyotoxa0K.,Synthesis,1998,910-14)。xa0用三溴硼烷(McOmie.J.F.W,Tetrahedron,1968,24,2289-92)或通过氢化作xa0用(Felixxa0A.,Jxa0Orgxa0Chem,1978,43,4194-97)使甲氧基或苄氧基苯并噻吩(15)去保护会生成羟基苯并噻吩(16)。用氯化亚锡来还原硝基苯并噻吩化合物(15)会生成氨基-苯并噻吩(18)(Matassaxa0V.,Jxa0Medxa0Chem,1990,33,2621-29)。xa0使用与合成化合物(11)或(13)相同的条件来将这些化合物(16)和(18)转化为相应的氨基磺酸酯(17)或氨基磺酰基胺(19)。xa0遵循Grivasxa0S.和Ronnexa0E.(Actaxa0Chemicaxa0Scandinavia,1995,49,225-229)所描述的条件,由三氟乙酸中的过氧化氢或由二氯甲烷中的间氯过苯酸对苯并噻吩中的硫进行氧化会生成氧化苯并噻吩(Ongxa0H.H.,Jxa0Medxa0Chem,1987,30,12,2295-2303)。xa0当X为CO或CS时,酰胺、硫代酰胺、酮、硫酮的还原作用或氧化硫官能基的还原作用是遵循Ellefsonxa0C.(Jxa0Medxa0Chem,1981,24,1107-10)、Hajosxa0J.(ComplexHydrides,Elsevier,Newxa0York,1979)或Drabowiczxa0S.(Orgxa0Prepxa0ProcedInt,1977,9,63-83)和Bordwellxa0J.(Jxa0Amxa0Chemxa0Soc,1951,73,2251-53)所描述的条件或遵循标准条件(Marchxa0J.,Advancedxa0Organicxa0Chemistry,第四版,Wileyxa0Ihterscience,New-York)来进行。这些氧化和还原步骤在合成过程的任何步骤中都会有效。xa0流程IIbxa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>根据流程IIb,遵循与化合物(3)相同的合成方法从化合物(1)和(20)或(9)和(20)开始反应来合成化合物(21)。xa0由水性金属氢氧化物处理(Svobodaxa0J.,Collectxa0Czechxa0Chemxa0comm,2000,65,7,1082-92或Sallxa0D.,Jxa0Medxa0Chem,2000,43,4,649-63)3-卤代苯并噻吩衍生物(21)会生成3-羟基苯并噻吩衍生物(22),或由丙酮或乙醇中的氨水处理(Bordwellxa0F.,J.A.C.S.,1948,70,1955-58)3-卤代苯并噻吩衍生物(21)会生成3-氨基苯并噻吩衍生物(24)。xa02-羟基苯并噻吩衍生物(22)或2-氨基苯并噻吩衍生物(24)分别通过以吡啶盐酸盐使2-甲氧基苯并噻吩衍生物(21)去保护(Cannizzoxa0S.,Jxa0Heterocyclicxa0Chem,1990,27,2175-79)和通过以氯化亚锡还原2-硝基苯并噻吩化合物(21)(Matassaxa0V,Jxa0MedChem,1990,33,2621-29)来进行。xa0使用与合成化合物(11)或(13)的相同条件可将这些化合物(22)和(24)氨磺酰化以生成(23)和(25)。xa0以氨基化锂或烷基化锂使2-H-苯并噻吩衍生物(21)去保护会导致C-2位置的锂化。添加磺酰氯会生成氯磺酰基化合物,而后经丙酮中的氨水处理(Grahamxa0S.,Jxa0Medxa0Chem,1989,32,2548-54)生成2-磺酰胺苯并噻吩衍生物(21),或者在添加干冰之后水解会生成2-羧酸苯并噻吩衍生物(21)(Mateckaxa0D.,Jxa0Medxa0Chem,1997,40,705-16)。xa0用三氯乙酰氯/氯化铝来处理3-H-苯并噻吩衍生物,然后用水(Bonjouklianxa0R.,Synthxa0Comm,1985,15,8,711-13)或氨水(Turnbullxa0K.,Jxa0Heterocyclxa0Chem,2000,37,2,383-88)水解,由此来制备3-羧酸或羧酰胺苯并噻吩衍生物(21)。xa0遵循Chapmanxa0N.(J.xa0Chem.Soc.,1970,18,2431-35)或Hagemanxa0W.(Ger.Offen.,3435173,1985年4月11日)所描述的条件来制备3-磺酰胺衍生物(21)。xa0苯并噻吩中的硫的氧化和羧酰胺、硫代酰胺、酮、硫酮、氧化硫官能基的还原可遵循已在本说明书中提出的相同条件以任何合成步骤进行。xa0流程IIIxa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="691"/>根据流程III,化合物(27)是通过使用标准条件(Marchxa0J.,Advancedxa0OrganicChemistry,第四版,Wileyxa0Interscience,Newxa0York)来缩合N-咪唑并苯胺(9)与异氰酸酯衍生物(26)而获得的。多数异氰酸酯衍生物(26)是市售的或是由普通化学方法合成的。xa0遵循与流程Ib中的化合物(10)和(12)相同的合成方法来合成化合物(28)和(30)。xa0遵循与流程Ib中的化合物(11)和(13)相同的合成方法来合成化合物(29)和(31)。xa0流程IVxa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>根据流程IV,二芳基化合物(33)可遵循与化合物(8)相同的合成方法由衍生物(32)来合成。衍生物(32)是市售的或是由普通化学方法合成的(例如,Burawayxa0S,Jxa0Chemxa0Soc,1955,2557;Tilleyxa0Jxa0W,Jxa0Medxa0Chem,1989,32,8,1814)。xa0流程Vxa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>根据流程V,化合物(35)是遵循与化合物(8)相同的合成方法由杂环(34)(在任何位置处有一或两个氮原子)来合成的。杂环(34)是市售的或是由普通化学方法来合成的(见下列实例)。卤化吡啶衍生物(34)可遵循发表文献(Biorgxa0Medxa0Chemxa0Lett,1996,6,21,2613;Myersxa0Axa0G,Jxa0Orgxa0Chem,1996,61,813;Tetrahedron,1993,49,19,4085)来获得或可从羧酸获得(WOxa00177078)。卤化嘧啶衍生物(34)可由普通卤化作用(Isodaxa0S,Chemxa0pharmxa0Bull,1980,28,5,1408;Marchxa0J.,Advancedxa0OrganicChemistry,第四版,Wileyxa0Interscience,New-York)从烷基嘧啶获得(Budesinsky,Collect,Czech,Chemxa0Commun,1968,33,7,2266;Kuniedaxa0T,Jxa0Amxa0Chemxa0Soc,1971,93,3487)或可从甲醛获得(Bredereck,Chemxa0Ber,1967,100,11,3664;Adamsxa0Jxa0L,Bioorgxa0Medxa0Chemxa0Lett,1998,8,22,3111),且羧酸(Huffmanxa0Kxa0R,Jxa0Orgxa0Chem,27,1962,551;Davesxa0Jxa0Orgxa0Chem,1961,26,2755)可转化为酰基氯(34)。卤化吡嗪衍生物(34)可通过溴化作用从烷基吡嗪获得(Lutzxa0Wxa0B,Jxa0Orgxa0Chem,1964,29,415)或可从甲醛获得(USxa03558625),且羧酸(Satoxa0N,Jxa0Heterocyclxa0Chem,19,1982,407-408;Felderxa0P,Helvxa0Chimxa0Acta,1964,47,873)可转化为酰基氯(34)。卤化哒嗪衍生物xa0(34)可遵循Pirasxa0S(Farmaco,1993,48,9,1249)、Yanai(Heterocycles,1976,4,1331)或通过烷基哒嗪的卤化作用(Becker,Jxa0Praktxa0Chem,1970,312,591;DE1950491)来获得,且羧酸(Bogerxa0Dxa0L,Jxa0Amxa0Chemxa0Socxa01987,109,9,2717)可转化为酰基氯(34)。xa0对所有流程IIa、IIb、III、IV、V来说,可由已对流程Ia所描述的方法来合成羧酸酯衍生物、磺酰胺衍生物和四唑衍生物,并且遵循本说明书中已提出的相同条件来进行R8及(R9)p。xa0为R₃、R₄、R₈及R₉描述的基团可通过普通化学方法来获得(参考可见对硫酸酯酶(Nussbaumerxa0P,Medecinalxa0Research,2004,24,4,529-76)、碳酸酐酶(Supuranxa0CT,Carbonicxa0anhydrase,2004,Cxa0Rxa0Cxa0press)的综述和Parkxa0Jxa0D(Jxa0Heterocyclxa0Chem,2000,37,2,383-88)、Schreinerxa0Exa0P(Bioorgxa0Medxa0Chemxa0Lett,2004,14,4999-5002)与Taylorxa0Sxa0D(Bioorgxa0Medxa0Chemxa0Lett,2004,14,151-155)的文章)。xa0以下实例旨在说明而非限制本发明的范围。xa0制备N,N-二取代肼(4)xa0实例1N¹-(4-氰基苯基甲基)-N¹-(4-甲氧基苯基)肼xa0伴随搅拌将氯甲基苯甲腈(25g,164.90mmol)引入含有甲苯(200ml)和三乙胺(46.40ml,329.80mmol)的烧瓶中。逐份添加4-甲氧基-苯肼盐酸盐(28.80g,164.90mmol)且在回流下将反应混合物搅拌3小时。冷却后,过滤混合物,用甲苯(50ml)和水(200ml)洗涤,得到白色固体(27.20g,65%),熔点:115°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):3.65(s,3H),4.30(s,2H),4.57(s,2H),6.77(d,2H),6.94(d,2H),7.48(d,2H),7.76(d,2H)。xa0制备咪唑(9)xa0实例24-[N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0a)4-[N-(2,3-二氢-1H-咪唑-1-基-2-硫酮)氨基]苯甲腈xa0将2,2-二甲氧基乙基异硫氰酸酯(6.25g,42.4mmol)逐滴添加到4-氰基苯肼盐酸盐(6.00g,35.40mmol)的乙醇(60ml)悬浮液中,并将反应混合物加热回流2小时。冷却后,在真空中蒸发溶剂,用乙酸/水(9/1,32ml)稀释所得油状物,并将悬浮液加热回流1.5小时,并在室温中隔夜。将所得残余物倾入水(300ml)中,并收集棕色沉淀物。在用乙醇研制后,由棕色固体产生白色固体(4.60g,58%)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):6.54(d,2H),7.00(t,1H),7.23(t,1H),7.62(d,2H),9.83(s,1H),12.40(s,1H)。xa0b)4-[N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0将35%过氧化氢(4.90ml,55.5mmol)逐滴添加到4-[N-(2,3-二氢-1H-咪唑-1-基-2-硫酮)氨基]苯甲腈(4.00g,18.50mmol)的乙酸(20ml)冰冷却悬浮液中。当TLC显示出完全反应时,用水稀释反应混合物,用氢氧化钠将pH值调节到11,用亚硫酸氢钠处理并用乙酸乙酯萃取。经硫酸钠干燥有机层并在真空中浓缩。硅胶快速色谱法(甲苯/二恶烷:6/4)产生纯油,并从乙醇结晶得到白色晶体(4.40g,58%),熔点:162°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):6.50(d,2H),7.08(s,1H),7.30(s,1H),7.66(d,2H),7.83(s,1H)。xa0制备苯并噻吩衍生物(14)和(20)xa0实例31-氯-3-(3-甲氧基苯基)硫基-丙-2-酮xa0在0°C下将3-甲氧基苯硫酚(14.02g,0.1mol)和氢氧化钠(4.00g,0.10g)的水(100ml)悬浮液添加到1,3-二氯-2-丙酮(12.70g,0.1mol)的甲醇/水(100ml,1∶3)搅拌溶液中。将混合物在0°C下搅拌7小时并在室温下搅拌10小时。将沉淀产物用二氯甲烷(100ml)萃取、用水(80ml)洗涤并用硫酸钠干燥。移除溶剂后,获得合格产物(油状物,18.70g)。xa0¹H-NMR(CDCl₃):3.80(s,3H),3.83(s,2H),4.29(s,2H),6.78(dd,1H),6.98(d,1H),6.90(dd,1H),7.21(t,1H)。xa0实例43-氯甲基-6-甲氧基-苯并噻吩xa0在室温下将上述硫化合物(17.50g,75.85mmol)的CH₂Cl₂(1700ml)溶液在氮气氛下逐滴添加到BF₃.Et₂O(10.60ml,83.44mmol)的CH₂Cl₂(100ml)溶液中。将混合物搅拌隔夜并在用NaHCO₃水溶液水解后,搅拌反应混合物直到两相都变得澄清。分离CH₂Cl₂层并用CH₂Cl₂萃取水层。将合并后的有机相用Na₂SO₄干燥、过滤并在真空中浓缩,得到油状物(18.00g)。硅胶快速色谱法(甲苯/石油精40-60°C:5/5)得到3-氯甲基-4-甲氧基-苯并噻吩∶3-氯甲基-6-甲氧基-苯并噻吩的1∶10的油状混合物(12.35g,58%)。xa0主要异构体¹H-NMR(CDCl₃):3.89(s,3H),4.82(s,2H),7.08(dd,1H),7.30xa0(s,1H),7.35(d,1H),7.78(d,1H)。xa0实例53-溴-6-苄氧基-苯并噻吩xa0将N-溴代丁二酰亚胺(15.70g,83.92mmol)和对甲苯磺酸(2.70g,15.68mmol)添加到6-苄氧基-苯并噻吩(Zhengyingxa0C.,CNxa01370533xa0A,21.2g,88.33mmol)的1,2-二氯乙烷(120ml)溶液中。将混合物在80°C下保持35分钟,在冰浴中冷却并通过过滤来移除丁二酰亚胺。用饱和碳酸氢钠溶液萃取所述溶液、经Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下浓缩,得到油状物。从戊烷进行结晶得到白色固体(21.60g,92%,熔点:68°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.14(s,2H),7.08(dd,1H),7.25-7.55(m,6H),7.65(d,1H),7.76(d,1H)。xa0实例63-溴-6-苄氧基-苯并噻吩-1,1-二氧化物xa0将35%的过氧化氢水溶液(2.00ml,19.54mmol)添加到3-溴-6-苄氧基-苯并噻吩(2.00g,6.27mmol)的二氯甲烷(50ml)和三氟乙酸(1.5ml)溶液中。8小时后,在50°C下用饱和NaHCO₃水溶液水解所述混合物,用二氯甲烷萃取、以Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下浓缩,得到粗产物。硅胶快速色谱法(甲苯/乙酸乙酯:9/1)产生澄清油状物(1.10g,55%)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.20(s,2H),7.20-7.60(m,7H),7.72(d,1H),7.83(s,1H)。xa0实例7(6-苄氧基-苯并噻吩-2-基)甲醇xa0在-30°C下,将LiAlH₄(0.85g,22.26mmol)的冷却悬浮液逐滴添加到6-苄氧基-苯并噻吩-2-甲醛(由Nomuraxa0Y.,WOxa09635688xa0A1描述,6.50g,24.20mmol)的THF(50ml)溶液中。升温到室温后,将混合物搅拌隔夜、冷却到-10°C、用冰水水解、用二氯甲烷萃取、以Na₂SO₄干燥、过滤并在真空中浓缩,得到粗产物。硅胶快速色谱法(甲苯/乙酸乙酯:7/3)产生澄清油状物(4.50g,69%)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):4.68(s,2H),5.13(s,2H),5.60(s,1H),7.00(dd,1H),7.14(s,1H),7.25-7.80(m,7H)。xa0实例86-苄氧基-2-(氯甲基)-苯并噻吩xa0将磺酰氯(20ml)添加到(6-苄氧基-苯并噻吩-2-基)甲醇(4.20g,15.50mmol)的二氯甲烷(40ml)溶液中。将所述混合物在回流条件下保持2小时,在室温下冷却,然后在真空中浓缩,得到4.20g油状物。xa0¹H-NMR(CDCl₃):4.75(s,2H),5.04(s,2H),6.95(dd,1H),7.10(s,1H),7.20-7.60(m,7H)。xa0制备式(8,33,35)的咪唑xa0使用与实例2中所述相同的步骤,但用以下物质来替换4-氰基苯肼盐酸盐:xa0N¹-(4-氰基苯基甲基)-N¹-(4-甲氧基苯基)肼,xa0获得下列化合物:xa0实例94-[N-(1H-咪唑-1-基)-N-(4-甲氧基苯基)氨基]甲基苯甲腈xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):3.70(s,3H),4.90(s,2H),6.60-7.00(m,5H),7.40(s,1H),7.55(d,2H),7.70(s,1H),7.78(d,2H)。xa0从盐酸乙醇结晶,得到白色晶体(5.70g,66%)。熔点:207°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):3.70(s,3H),4.97(s,2H),6.93(d,2H),7.13(d,2H),7.45(d,2H),7.70(s,1H),7.84(d,2H),8.04(s,1H),8.18(s,1H),9.55(s,1H)。xa0实例104-[N-(4-羟基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基苯甲腈xa0将三溴化硼(60ml,60.00mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液添加到4-[N-(1H-咪唑-1-基)-N-(4-甲氧基苯基)氨基]甲基苯甲腈(4.60g,15.11mmol)的冷(0-5°C)溶液中。室温下1小时后,用饱和NaHCO₃水溶液水解所述混合物、过滤、用水(50ml)及二氯甲烷(20ml)洗涤,得到棕色固体(4.00g)。从丙酮结晶产生棕色固体(3.00g,68%),熔点:150°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):4.84(s,2H),6.70(s,4H),6.90(s,1H),7.45-7.62(m,3H),7.62-7.90(m,3H),9.25(s,1H)。xa0实例114-[N-(4-羟基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0在室温下将4-羟基苄基溴(15.6g,84.3mmol,遵循Wissnerxa0A.等人的J.Med.Chem.1992,35,1650制备)添加到4-[N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈(10.00g,54.30mmol)与K₂CO₃(8.20g,59.70mmol)在无水THF(150ml)中的混合物中。然后在室温下将xa0所述混合物搅拌2小时并在倾入水中且用乙酸乙酯萃取后,以Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下浓缩,得到粗产物(16.00g,呈固体状)。从乙酸乙酯用乙醇结晶得到预期产物(6.50g,41%,熔点:180°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):4.80(s,2H),6.65(d,2H),6.91(s,1H),7.04(d,1H),7.20(s,1H),7.56(s,1H),7.63(d,2H)。xa0使用相同步骤,但以下列各物来替换4-羟基苄基溴:xa0-3-氯-4-羟基苄基溴;xa0-3-溴-4-羟基苄基溴;xa0-4-羟基-3-甲氧基苄基溴;xa0-2,3,5,6-四氟-4-羟基苄基氯(遵循Angyalxa0S.J.等人的J.Chem.Soc.1950,2141制备);xa0-3-甲酰基-4-羟基苄基氯(遵循Angyalxa0S.J.等人的J.Chem.Soc.1950,2141制备);xa0-1-苄氧基-4-(2-溴-乙氧基)-苯(遵循Brinkmanxa0J.等人的Bioorg.Med.Chem.Lett.,1996,6,21,2491-94制备);xa0-2-氯-5-氯甲基-吡啶;xa0-4-(溴甲基)苯磺酰胺(遵循Colescottxa0R.等人的J.Am.Chem.Soc.,1957,79,4232-35制备);xa0-4-(氯甲基)-2-硝基-苯酚(遵循拜尔专利DExa0132475制备);xa0-5-氯甲基-2-甲氧基-苯甲酸(遵循Leonardxa0F.等人的J.Med.Chem.,1965,8,812-15制备);xa0分别获得下列化合物。xa0实例124-[N-(3-氯-4-羟基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0熔点:195°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):4.88(s,2H),6.67(d,2H),6.88(d,2H),6.98(s,1H),7.05(dd,1H),7.24(d,1H),7.33(s,1H),7.70(s,1H),7.72(d,2H),10.28(s,1H)。xa0实例134-[N-(3-溴-4-羟基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0熔点:198°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):4.90(s,2H),6.65(d,2H),6.85(d,1H),6.99(s,1H),7.07(d,1H),7.30(s,1H),7.40(s,1H),7.65(s,1H),7.67(d,2H),10.40(s,1H)。xa0实例144-[N-(4-羟基-3-甲氧基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0熔点:215°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):3.70(s,3H),4.89(s,2H),6.68(s,2H),6.70(d,2H),6.80(s,1H),6.99(s,1H),7.30(s,1H),7.63(s,1H),7.72(d,2H),9.20(s,1H)。xa0实例154-[N-(2,3,5,6-四氟-4-羟基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0熔点:243°Cxa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.09(s,2H),6.72(d,2H),7.00(s,1H),7.32(s,1H),7.69(d,2H),7.77(s,1H),11.80(s,1H)。xa0实例164-[N-(3-甲酰基-4-羟基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0熔点:160°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):4.95(s,2H),6.70(d,2H),6.90(s,1H),6.96(d,1H),7.35(s,1H),7.44(dd,1H),7.58(d,1H),7.67(s,1H),7.71(d,2H),10.20(s,1H),10.75(s,1H)。xa0实例174-{N-[2-(4-苄氧基-苯氧基)乙基]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]}苯甲腈xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):3.95-4.10(m,2H),4.11-4.28(m,2H),5.01(s,2H),6.60(d,2H),6.82(d,2H),7.95(d,2H),7.03-7.50(m,7H),7.69(d,2H),7.88(s,1H)。xa0实例184-{N-[(6-氯吡啶-3-基)甲基]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基}苯甲腈xa0熔点:156°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.10(s,2H),6.71(d,2H),7.00(s,1H),7.42(s,1H),7.49(d,1H),7.55-7.90(m,4H),8.34(d,1H)。xa0实例194-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基}苯磺酰胺xa0熔点:150°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.15(s,2H),6.62(d,2H),7.00(s,1H),7.36(s,2H),7.45(s,1H),7.55(d,2H),7.65-7.90(m,5H)。xa0实例204-[N-(4-羟基-3-硝基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0熔点:205°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):4.98(s,2H),6.72(d,2H),7.00(s,1H),7.06(d,1H),7.39(s,1H),7.48(d,1H),7.60-7.78(m,3H),7.82(s,1H)。xa0实例215-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基}-2-甲氧基苯甲酸xa0熔点:187°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):3.79(s,3H),5.00(s,2H),6.69(d,2H),6.98(s,1H),7.05(d,1H),7.31(s,1H),7.39(dd,1H),7.55(d,1H),7.62-7.85(m,3H)。xa0实例224-[N-(1H-咪唑-1-基)-N-(4-硝基苯基)氨基]苯甲腈xa0在10-15°C下伴随搅拌,将4-[N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈(10.00g,54.30mmol)逐份添加到叔丁醇钾(6.69g,59.73mM)的DMSO(100ml)悬浮液中。在室温下将所述混合物搅拌30分钟,然后逐滴添加在DMSO(15ml)中的4-硝基-氟苯(7.60g,54.00mM),同时将温度保持在30°C以下。2小时后,将所述混合物倾入水(800ml)中且通过过滤来收集所得沉淀物,并从乙醇结晶纯化(1.00g,48%,熔点:188°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):7.00(d,2H),7.17(s,1H),7.26(d,2H),7.65(s,1H),7.90(d,2H),8.20(s,1H),7.22(d,2H)。xa0使用相同步骤,但以下列各物替换4-硝基-氟苯:xa0-6-氯-烟酰氯;xa0-4-氟苯基乙酰氯;xa0-4-羟基苯基乙酰氯;xa0-4-羟基苯基丙酰氯(遵循Eliasxa0H.等人的Macromol.Chem.Phys.,1981,182,681-86制备);xa0-4-苯基甲氧基苯磺酰氯(遵循Tojaxa0E.等人的Eur.J.Med.Chem.1991,26,403-13制备);xa0分别获得下列化合物:xa0实例236-氯-N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)烟酰胺xa0熔点:132°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):6.98(s,1H),7.40-7.62(m,3H),7.70(s,1H),7.95(d,2H),8.00(d,1H),8.19(s,1H),8.57(d,1H)。xa0实例24N-(1H-咪唑-1-基)-N-(4-氰基苯基)-2-(4-氟苯基)乙酰胺xa0熔点:131°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):3.57(s,2H),7.00-7.35(m,5H),7.55(d,2H),7.70(s,1H),7.93(d,2H),8.19(s,1H)。xa0实例25N-(1H-咪唑-1-基)-N-(4-氰基苯基)-2-(4-羟基苯基)乙酰胺xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):3.32(s,2H),6.65(d,2H),6.87(d,2H),7.08(s,1H),7.50(d,2H),7.70(s,1H),7.90(d,2H),8.10(s,1H),9.30(s,1H)。xa0实例26N-(4-氰基苯基)-3-(4-羟基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)丙酰胺xa0熔点:172°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):2.25-2.60(m,2H),2.65-2.90(m,2H),6.63(d,2H),6.90(d,2H),7.08(s,1H),7.51(d,2H),7.61(s,1H),7.90(d,2H),8.10(s,1H),9.20(s,1H)。xa0实例27N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)-4-(苯基甲氧基)-苯磺酰胺xa0¹H-NMR(CDCl₃):5.14(s,2H),6.93(t,1H),7.00-7.15(m,3H),7.30-7.45(m,7H),7.50(s,1H),7.66(d,2H),7.68(d,2H)。xa0制备式(15)、(21)的咪唑xa0实例285-硝基-[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)]-苯并噻吩-2-甲酰胺xa0在室温下将5-硝基-苯并噻吩-2-羰基氯(商业化合物,10.00g,41.00mmol)添加到4-[N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈(7.55g,41.00mmol)、TEA(20ml,143.00mmol)在无水THF(150ml)中的混合物中。然后在室温下将所述混合物搅拌隔夜并过滤沉淀、xa0用THF、水洗涤,得到呈固体状的粗产物(9.26g)。由乙醇进行结晶得到白色晶体(3.50g,熔点:221°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):7.10(s,1H),7.54(s,1H),7.70(d,2H),7.82(s,1H),7.98(d,2H),8.15-8.40(m,3H),8.89(s,1H)。xa0使用相同步骤,但以以下物质替换5-硝基-苯并噻吩-2-羰基氯:xa06-甲氧基-苯并噻吩-3-乙酰氯(由Sauterxa0F.的Monatsheftexa0Fuerxa0Chemie,1968,99,2,610-15描述),获得下列化合物:xa0实例29N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)-2-(6-甲氧基-苯并噻吩-3-基)乙酰胺xa0熔点:104°Cxa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):3.75-3.85(m,5H),7.02(dd,1H),7.13(s,1H),7.30(s,1H),7.50-7.75(m,4H),7.80(s,1H),7.90(d,2H),8.25(s,1H)。xa0实例304-{N-[1H-咪唑-1-基]-N-[(6-甲氧基-苯并噻吩-3-基)甲基]氨基}苯甲腈xa0在室温下将3-氯甲基-6-甲氧基-苯并噻吩(12.35g,58.06mmol)添加到4-[N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈(9.72g,52.78mmol)、K₂CO₃(14.60g,105.56mmol)和碘化钾(0.10g,0.60mmol)在无水DMF(70ml)中的混合物中。然后在室温下将所述混合物搅拌隔夜并在倾入水中且由乙酸乙酯萃取后,经Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下浓缩,得到呈固体状的粗产物(14.30g)。硅胶快速色谱法(甲苯/二恶烷:6/4)产生预期产物(10.50g,55%,粉末状)。由乙醇进行结晶得到白色晶体(7.30g,熔点:164°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):3.80(s,3H),5.25(s,2H),6.74(d,2H),6.93(s,1H),7.02(dd,1H),7.28(s,1H),7.40(s,1H),7.53(s,1H),7.55(s,1H),7.68(d,1H),7.75(d,2H)。xa0实例314-[N-(6-苄氧基-1,1-二氧化-苯并噻吩-3-基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0在10-15°C下伴随搅拌,将4-[N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈(0.50g,27.14mmol)逐份添加到叔丁醇钾(0.35g,31.00mmol)的THF(20ml)悬浮液中。在室温下将所述混合物搅拌30分钟,然后逐滴添加THF(5ml)中的3-溴-6-苄氧基-苯并噻吩-1,1-二氧化物(1.10g,31.33mM),同时将温度保持在30°C以下。一夜以后,将所述混合物倾入水(200ml)中并以乙酸乙酯萃取、以Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下浓缩以得到xa0油状粗产物(2.50g)。硅胶快速色谱法(甲苯/1,4-二恶烷:7/3)和在乙醇中结晶得到浅棕色晶体(1.20g,95%,熔点:146°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.22(s,2H),6.48(s,1H),6.49(d,1H),7.05-7.20(m,2H),7.25-7.50(m,8H),7.60(d,1H),7.73(s,1H),7.94(d,2H)。xa0使用相同步骤,但以以下物质替换3-溴-6-苄氧基-苯并噻吩-1,1-二氧化物:6-苄氧基-2-(氯甲基)-苯并噻吩,xa0获得下列化合物:xa0实例324-[N-[(6-苄氧基-苯并噻吩-2-基)甲基]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.12(s,2H),5.30(s,2H),6.72(d,2H),7.00(s,1H),7.04(dd,1H),7.23(s,1H),7.27-7.90(m,11H)。xa0制备式(10)、(16)的咪唑xa0实例334-{N-[(6-羟基-苯并噻吩-3-基)甲基]-N-[1H-咪唑-1-基-]氨基}苯甲腈xa0在室温下将4-{N-[1H-咪唑-1-基]-N-[(6-甲氧基-苯并噻吩-3-基)甲基]氨基}苯甲腈(0.50g,1.39mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液添加到1M三溴化硼的二氯甲烷(1.50ml,1.52mmol)溶液中。室温下2小时后,将所述混合物用饱和NaHCO₃水溶液水解、用二氯甲烷萃取、以Na₂SO₄干燥、过滤并在真空中浓缩。由硅胶快速色谱法(甲苯/二恶烷:6/4)来纯化粗产物以得到预期产物(0.30g,62%,粉末状)。由乙醇进行结晶得到白色晶体(0.10g,熔点:169°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.24(s,2H),6.72(d,2H),6.87(dd,1H),6.94(s,1H),7.27(d,2H),7.29(s,1H),7.55(s,1H),7.56(d,1H),7.75(d,2H),9.67(s,1H)。xa0使用相同步骤,但以以下物质替换4-{N-[1H-咪唑-1-基]-N-[(6-甲氧基-苯并噻吩-3-基)甲基]氨基}苯甲腈:xa0N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)-2-(6-甲氧基-苯并噻吩-3-基)-乙酰胺,获得下列化合物:xa0实例34N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)-2-(6-羟基-苯并噻吩-3-基)乙酰胺熔点:179°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):3.72(s,2H),6.85(dd,1H),7.10(d,2H),7.25(d,1H),xa07.40-7.70(m,3H),7.80(s,1H),7.91(d,2H),8.24(s,1H),9.60(s,1H)。xa0实例354-[N-(3-氨基-4-羟基-苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0以Pd/C(在碳上为10重量百分比,0.2g)的乙醇(30ml)悬浮液来氢化4-[N-(4-羟基-3-硝基-苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈(2g,5.97mmol)。当TLC显示完全反应时,经硅藻土(celarum)过滤混合物、以EtOH清洗。在真空下浓缩溶剂。从EtOH/石油醚结晶得到橙色晶体(1.1g,60.5%,熔点:208°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):4.60(s,2H),4.79(s,2H),6.80(d,1H),6.40-6.80(m,4H),6.99(s,1H),7.25(s,1H),7.50-7.80(m,3H),9.07(s,1H)。xa0使用相同步骤,但以下列各物来替换4-[N-(4-羟基-3-硝基-苄基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈:xa0-4-{N-[2-(4-苄氧基-苯氧基)乙基]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]};xa0-苯甲腈;xa0-N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)-4-(苯基甲氧基)-苯磺酰胺;xa0分别获得下列化合物:xa0实例364-{N-[2-(4-羟基苯氧基)乙基]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基}苯甲腈xa0熔点:188°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):4.99(t,2H),4.17(t,2H),6.40-6.85(m,6H),7.10(s,1H),7.40(s,1H),7.68(d,2H),7.86(s,1H),8.95(s,1H)。xa0实例37N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)-4-羟基苯磺酰胺xa0熔点:248°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):6.95(d,2H),7.00(s,1H),7.24(s,1H),7.49(d,2H),7.52(d,2H),7.88(s,1H),7.92(d,2H),10.95(s,1H)。xa0实例384-[N-[(6-羟基-1,1-二氧化-苯并噻吩-3-基)]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0在环境温度下将4-[N-[(6-苄氧基-1,1-二氧化-苯并噻吩-3-基)]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈(3.00g,6.78mmol)、10%的Pd/C(0.50g)、THF(30ml)和甲酸铵溶液(H₂O中25%,30ml)的混合物搅拌6小时并过滤。将所述混合物倾入水中并以乙酸乙酯萃取,经Na₂SO₄干燥,过滤并在真空下浓缩以得到粗产物(2.50g,呈固体状)。xa0从乙醇结晶得到白色晶体(0.80g,26%,熔点:260°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):6.25(s,1H),6.29(d,1H),6.82(dd,1H),7.10(s,1H),7.15(s,1H),7.30(d,2H),7.70(s,1H),7.91(d,2H),8.25(s,1H)。xa0使用相同步骤,但以以下物质来替换4-[N-[(6-苄氧基-1,1-二氧化-苯并噻吩-3-基)]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈:xa04-[N-[(6-苄氧基-苯并噻吩-2-基)甲基]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈,xa0获得下列化合物:xa0实例394-[N-[(6-羟基-苯并噻吩-2-基)甲基]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0熔点:230°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.28(s,2H),6.70(d,2H),6.82(dd,1H),7.00(s,1H),7.15-7.21(m,2H),7.31(s,1H),7.55(d,1H),7.69-7.80(m,3H),9.63(s,1H)。xa0制备式(12)、(18)的咪唑xa0实例404-[N-(4-氨基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0在回流条件下伴随搅拌将肼(1.52ml,49.00mmol)逐份添加到4-[N-(1H-咪唑-1-基)-N-(4-硝基苯基)氨基]苯甲腈(3.00g,9.80mM)和5重量百分比的钌碳(0.30g,0.15mM)的乙醇(35ml)悬浮液中。当TLC显示完全反应时,冷却混合物并过滤催化剂。在真空下浓缩溶剂。将残余物倾入水中并以二氯甲烷萃取、经Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下浓缩以得到粗产物(2.50g,呈固体状)。从乙酸乙酯以乙醇结晶,得到预期产物(1.30g,50%,熔点:147°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.50(s,2H),6.30(d,2H),6.69(d,2H),7.09(s,1H),7.29(d,2H),7.63(s,1H),7.65(d,2H),8.14(s,1H)。xa0实例415-氨基-[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)]-苯并噻吩-2-甲酰胺xa0将氯化亚锡二水合物(13.10g,58.00mmol)逐份添加到5-硝基-[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)]-苯并噻吩-2-甲酰胺(4.50g,11.6mM)的经搅拌乙醇(100ml)溶液中。在回流条件下加热所述混合物。当TLC显示完全反应时,冷却混合物并以饱和碳酸氢盐溶液将其碱化。以乙酸乙酯萃取混合物、以Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下浓缩以得到呈固体状的粗产物(3.90g)。从甲醇结晶,得到预期产物(2.60g,63%,熔点:214°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):6.70-6.98(m,3H),7.07(s,1H),7.40-7.25(m,4H),7.26-7.96(m,3H)。xa0氨磺酰化的通用步骤xa0制备氨基磺酸酯(11、17、23)和氨基磺酰基胺(13、19、25)xa0实例42氨基磺酸4-[N-(4-氰基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1基)氨基]苯基酯xa0在冰冷却条件下,将氨磺酰氯(2.39g,20.69mmol)添加到4-[N-(4-羟基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基苯甲腈(1.00g,3.45mmol)的无水DMAc(36ml)溶液中。然后在室温下将所述混合物搅拌6小时。添加TEA(3.40ml,24.73ml)后,将混合物倾入冷盐水中并以乙酸乙酯萃取、以Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下浓缩以得到粗产物(0.70g,呈固体状)。从乙酸乙酯结晶,得到预期产物(0.40g,31%,熔点:60°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.00(s,2H),6.70(d,2H),6.92(s,1H),7.19(d,2H),7.40(s,1H),7.55(d,2H),7.74(s,1H),7.77(d,2H),7.91(s,2H)。xa0使用相同步骤,但以下列各物来替换4-[N-(4-羟基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基苯甲腈:xa04-[N-(4-羟基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈;xa04-[N-(3-氯-4-羟基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈;xa04-[N-(3-溴-4-羟基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈;xa04-[N-(3-甲氧基-4-羟基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈;xa04-[N-(2,3,5,6-四氟-4-羟基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈;xa04-[N-(3-甲酰基-4-羟基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈;xa04-[N-(4-氨基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈;xa0N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)-4-羟基苯磺酰胺;xa04-{N-[2-(4-羟基苯氧基)乙基]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基}苯甲腈;xa0N-(1H-咪唑-1-基)-N-(4-氰基苯基)-2-(4-羟基苯基)乙酰胺;xa0N-(4-氰基苯基)-3-(4-羟基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)丙酰胺;xa04-[N-(3-氨基-4-羟基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈;xa05-氨基-[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)]-苯并噻吩-2-甲酰胺;xa04-[N-[(6-羟基-1,1-二氧化-苯并噻吩-3-基)]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈;xa0N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)-2-[(6-羟基-苯并噻吩-2-基)]乙酰胺;xa04-{N-[(6-羟基-苯并噻吩-3-基)甲基]-N-[1H-咪唑-1-基-]氨基}苯甲腈;xa04-{N-[(6-羟基-苯并噻吩-2-基)甲基]-N-[1H-咪唑-1-基-]氨基}苯甲腈;分别获得下列化合物。xa0实例43氨基磺酸-4-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基}苯基酯xa0熔点:172°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.00(s,2H),6.65(d,2H),7.00(s,1H),7.22(d,2H),7.40(s,1H),7.42(d,2H),7.70(s,1H),7.75(d,2H),8.00(s,2H)。xa0实例44氨基磺酸2-氯-4-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基}苯基酯xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.05(s,2H),6.63(d,2H),7.00(s,1H),7.35-7.45(m,3H),7.54(s,1H),7.70(d,2H),7.80(s,1H),8.29(s,2H)。xa0实例45氨基磺酸2-溴-4-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基}苯基酯,盐酸盐在EtOH/HCl中进行结晶(熔点:145°C)。xa0¹Hxa0NMR(DMSOxa0d₆):5.15(s,2H),6.90(d,2H),7.48(s,2H),7.60-7.85(s,5H),8.08(s,1H),8.32(s,2H),9.51(s,1H)。xa0实例46氨基磺酸2-甲氧基-4-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基}苯基酯xa0熔点:211°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):3.77(s,3H),5.02(s,2H),6.75(d,2H),6.92(d,1H),7.05(s,2H),7.25(d,1H),7.45(s,1H),7.71(d,2H),7.80(s,1H),7.93(s,2H)。xa0实例47氨基磺酸2,3,5,6-四氟-4-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基}苯基酯xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.37(s,2H),5.83(s,2H),6.86(d,2H),7.08(s,1H),7.41(s,1H),7.79(s,1H),7.81(d,2H)。xa0实例484-[N-[(2,2-二氧化-1,2,3-苯并恶噻嗪-6-基)甲基]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0熔点:180°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.17(s,2H),6.67(d,2H),7.02(s,1H),7.46(s,1H),7.50(d,2H),7.74(d,2H),7.82(dd,1H),7.87(s,1H),8.02(d,1H),9.19(s,1H)。xa0实例49N-{4-[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯基}磺酰胺xa0熔点:121°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):6.38(d,2H),7.09(s,1H),7.20(s,1H),7.22(d,2H),7.51(d,2H),7.63(s,1H),7.69(d,2H),8.19(s,1H)。xa0实例50氨基磺酸4-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]磺酰基}苯基酯,盐酸盐在EtOH/HCl中进行结晶。xa0熔点:200°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):7.57(d,2H),7.60(s,1H),7.70(d,2H),7.80-8.10(m,5H),8.40(s,2H),9.30(s,1H)。xa0实例51氨基磺酸4-{2-[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]乙氧基}苯基酯xa0熔点:174°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):4.08(t,2H),4.23(t,2H),6.60(d,2H),6.95(d,2H),7.10(s,1H),7.18(d,2H),7.42(s,1H),7.70(d,2H),7.88(s,3H)。xa0实例52氨基磺酸4-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)-氨甲酰基]-甲基}苯基酯xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):3.32(s,2H),7.12(s,1H),7.18-7.32(m,4H),7.50-7.60(d,2H),7.71(s,1H),7.85-8.05(m,4H),8.20(s,1H)。xa0实例53氨基磺酸4-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]-3-氧丙基}苯基酯xa0熔点:100°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):2.45(t,2H),3.85(t,2H),7.10(s,1H),7.12-7.30(m,4H),7.55(d,2H),7.65(s,1H),7.90(m,4H),8.12(s,1H)。xa0实例54氨基磺酸3-(氨基磺酰基)氨基-4-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1基)氨基]甲基}xa0苯基酯xa0熔点:197°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.00(s,2H),6.71(d,2H),6.93(d,1H),7.02(s,2H),7.21(d,1H),7.48(s,1H),7.61(d,2H),7.74(s,1H),7.92(s,2H),8.10(s,2H)。xa0实例555-(氨基磺酰基)氨基-[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)]-苯并噻吩-2-甲酰胺xa0熔点:169°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):6.87(d,1H),7.05-7.30(m,4H),7.56(s,1H),7.67(d,2H),7.80-8.10(m,4H),7.86(s,1H),9.65(s,1H)。xa0实例56氨基磺酸3-[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1基)氨基]-1,1-二氧化-苯并噻吩-6-基酯xa0熔点:172°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):6.24(s,1H),6.29(d,1H),6.85(dd,1H),7.15(s,1H),7.20(s,1H),7.30(d,2H),7.65(s,1H),7.95(d,2H),8.05(s,2H),8.25(s,1H)。xa0实例57氨基磺酸3-{2-[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]-2-氧乙基}-苯并噻吩-6-基酯xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):3.84(s,2H),7.15(s,1H),7.28-7.37(dd,1H),7.51-7.65(m,3H),7.80-7.98(m,5H),8.01(s,2H),8.29(s,1H)。xa0实例58氨基磺酸3-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基}-苯并噻吩-6-基酯xa0熔点:193°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.30(s,2H),6.80(d,2H),6.97(s,1H),7.30-7.40(m,2H),7.56(s,1H),7.68(s,1H),7.75(d,2H),7.80-7.95(m,2H),8.05(s,2H)。xa0实例59氨基磺酸2-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基}-苯并噻吩-6-基酯xa0熔点:178°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.17(s,2H),6.65(d,2H),6.89(dd,1H),6.94(s,1H),xa07.20(d,2H),7.27(s,1H),7.45(s,1H),7.58(d,1H),7.72(d,2H),8.00(s,2H)。xa0使用与实例13相同的步骤,但以以下物质来替换4-[N-(4-羟基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基苯甲腈:xa04-[N-(3-溴-4-羟基苯基甲基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0获得作为副产物的下列化合物:xa0实例602-溴-4-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基}苯基酰胺亚胺二硫酸酯xa0熔点:220°C。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):5.00(s,2H),5.70(s,2H),6.65(d,2H),7.03(s,1H),7.42(dd,1H),7.50(s,1H),7.55(d,1H),7.65(d,1H),7.72(d,2H),7.81(s,1H)。xa0制备其他化合物(8)xa0实例614-[N-[(2,2-二氧化-3,4-二氢-1,2,3-苯并恶噻嗪-6-基)甲基]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0将NaBH₄(0.08g,2.11mmol)逐份添加到4-[N-[(2,2-二氧化-1,2,3-苯并恶噻嗪-6-基)甲基]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈(0.40g,1.05mmol)的甲醇(8ml)悬浮液中,并在室温下将所述反应混合物搅拌3小时。在添加NH₄Cl(3ml)和水(40ml)的饱和溶液以后,过滤所获得的沉淀物、以水洗涤并干燥以得到白色固体。从乙酸乙酯以乙醇结晶,得到预期产物(O.40g,82%,熔点:190°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):4.55(d,2H),5.04(s,2H),6.64(d,2H),7.02(s,1H),7.03(d,1H),7.27(d,1H),7.30(s,1H),7.41(s,1H),7.70(d,2H),7.85(s,1H),8.56(t,1H)。xa0实例625-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基}-2-羟基苯甲酸xa0在150°C下加热5-{[N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]甲基}-2-甲氧基苯甲酸(1.00g,2.85mmol)和哌啶(0.42ml,8.57mmol)在二甲基乙酰胺(DMA)(2ml)中的混合物。在起始物质消失时(TLC监测),在真空中移除溶剂。硅胶快速色谱法(MeOH/二氯甲烷:5/95)和从乙醇结晶得到白色晶体(53mg,6%,熔点:260°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):4.85(s,2H),6.54(d,1H),6.66(d,2H),6.95(s,1H),xa07.05(dd,1H),7.24(s,1H),7.50-7.60(m,2H),7.68(d,2H)。xa0实例634-[N-(1H-咪唑-1-基)-N-(苯基)氨基]苯甲腈xa0将4-[N-(1H-咪唑-1-基)-N-(4-硝基苯基)氨基]苯甲腈(3.91g,12.80mmol)置于氢化烧瓶中,并将其溶解于乙酸酐(60ml)和乙酸(60ml)中。添加钯碳(10%,0.20g)并将瓶子连接到Parr氢化装置上。氢化作用在25psixa0H₂条件下伴随震荡进行3小时。通过过滤来移除催化剂并使溶液在浴中冷却30分钟。将亚硝酸钠(0.97g,14.00mmol)添加到混合物中,并轻轻封住所述容器。将烧瓶在冰浴中保持2小时并使其升温到室温隔夜。将混合物倾入冰/水中并过滤固体、以水(50ml)洗涤以得到粗产物。快速色谱法(甲苯/二恶烷:6/4)和从乙酸乙酯以乙醇结晶得到预期产物(0.40g,8%,熔点:162°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):6.60(d,2H),7.00-7.50(m,9H),7.69(s,1H)。xa0制备苯并恶噻唑(8)xa0实例644-[N-(3-甲苯磺酰基氨基-4-羟基-苄基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0在0°C下将CH₂Cl₂(20ml)中的甲苯磺酰氯(3.5g,18.59mmol)逐滴添加到(TX1840)(5.4g,17.7mmol)和吡啶(19.47mmol,1.6m)的CH₂Cl₂(50ml)溶液中。xa0然后在室温下将所述混合物搅拌4小时,然后将其倾入水中并以EtOAc萃取、以Na₂SO₄干燥、过滤并在真空下浓缩以得到粗产物(8.1g,呈橙色固体状)。xa0硅胶快速色谱法(甲苯∶二恶烷,7/3)产生黄色固体。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):2.32(s,3H),4.85(s,2H),6.60(d,2H),6.62(s,1H),6.80(dd,1H),6.97(s,1H),7.10-7.30(m,5H),7.00(d,2H),7.03(s,1H),7.52(d,2H),9.45(s,2H)。xa0实例654-[N-[(2,2-二氧化-3-甲苯磺酰基-3H-1,2,3-苯并恶噻唑-5-基)甲基]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0在-78°C下伴随搅拌经30分钟将二氯甲烷(50ml)中的硫酰氯(0.60ml,7.40mmol)逐滴添加到二氯甲烷(6ml)中的4-[N-(3-甲苯磺酰基氨基-4-羟基-苄基)-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈(3.40g,7.40mmol)和三乙胺(2.10ml,14.81mmol)中。额外15分钟后,使混合物升到室温,历经4小时。用水稀释反应混合物、以二氯甲烷萃取。使有机层经硫酸钠干燥并在真空下浓缩。硅胶快速色谱法(甲苯/二恶烷:5/5)得xa0到纯油(1.60g,41%)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):2.39(s,3H),5.18(s,2H),6.80(d,2H),7.00-7.50(m,6H),7.60-7.85(m,5H),8.02(s,1H)。xa0实例664-[N-[(2,2-二氧化-3H-1,2,3-苯并恶噻唑-5-基)甲基]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈xa0在室温下将水(5ml)中的氟化钾(0.36g,6.14mmol)添加到乙腈(15ml)中的4-[N-[(2,2-二氧化-3-甲苯磺酰基-3H-1,2,3-苯并恶噻唑-5-基)甲基]-N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈(1.60g,3.07mmol)中。将溶液搅拌隔夜、浓缩、以二氯甲烷萃取。使有机层经硫酸钠干燥并在真空下浓缩。硅胶快速色谱法(甲苯/二恶烷:5/5)得到油,并从乙醇结晶得到预期产物(0.17g,15%,熔点:230°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):4.84(s,2H),6.38(dd,1H),6.42(d,1H),6.63(d,1H),6.69(d,2H),7.15(s,1H),7.43(S,1H),7.70(d,2H),8.02(S,1H)。xa0制备苯基脲类(27)xa0实例67N-(4-氰基苯基)-N-(1H-咪唑-1-基)-N’-苯基脲xa0将异氰酸苯酯(3.6ml,32.6mmol)添加到4-[N-(1H-咪唑-1-基)氨基]苯甲腈(5g,27.17mmol)的THF(50ml)溶液中。在50°C下将混合物搅拌隔夜并在蒸发后在丙酮/EtOH中结晶以得到白色晶体(2.5g,30.3%,178°C)。xa0¹H-NMR(DMSOxa0d₆):6.59(s,1H),7.05-7.40(m,9H),7.52(d,2H),7.83(s,1H)。xa0生物测试结果活体外类固醇硫酸酯酶、芳香酶和碳酸酐酶II的抑制作用xa0硫酸雌酮(E₁S)是主要的循环血浆雌激素,其经由类固醇硫酸酯酶转化为雌酮(E₁),雌酮(E₁)接着可经由酶还原作用转化为雌二醇(E₂)。xa0临床上已经证明,由芳香酶抑制剂来抑制E₂合成是用于阻止激素依赖性乳房肿瘤扩散的良好方式。近来,类固醇硫酸酯酶途径的抑制作用已作为替代方式出现。因此,能够抑制芳香酶和类固醇硫酸酯酶抑制作用的化合物的开发似乎可作为一种新的适合用来抑制肿瘤生长的方法。xa0人类碳酸酐酶催化二氧化碳(CO₂)与碳酸氢根离子(HCO₃^-)之间的转化并与多种生理和病理过程相关。其包括对传统化学/放射疗法较少响应的激素依赖性与非激素依赖xa0性癌变、转移过程和缺氧肿瘤。因此,人类碳酸酐酶的抑制作用可以是双重芳香酶和硫酸酯酶抑制剂(DASI)化合物的有益额外活性。特别是,已发现EMATE具有与乙酰唑胺(即一种熟知的磺酰胺人类碳酸酐酶抑制剂)相类似的人类碳酸酐酶抑制效能。这些实验的目的在于评估新化合物对芳香酶和/或类固醇硫酸酯酶活性的活体外抑制能力。此外,将其中一些化合物对人类碳酸酐酶II活性(作为人类碳酸酐酶的实例)的抑制作用与6,6,7xa0COUMATE和乙酰唑胺进行比较评估。xa0材料和方法xa0a)芳香酶活性从人类胎盘绒毛膜癌得到的JEG-3细胞系组成性地过度表达人类芳香酶,而且是用于活体外检验假定芳香酶抑制剂的相关模型。由氚化水方法来测定芳香酶活性。简单地说,首先将细胞接种于经去补体胎牛血清(dFCS)补充的培养基中的96孔微板中。24小时后,清洗细胞,并添加作为芳香酶底物的含有1β-³H-雄烯二酮的新鲜培养基连同浓度介于10^-12M到10^-5M之间的受试化合物。培育2小时后,将一部分培养基转移到类似的新96孔微板中,并将经葡聚糖涂覆的活性炭溶液添加到各孔中。在冰上静置10分钟以后,将微板离心(1500g;4°C)。包括放射性底物和新生物合成的雌激素的所有类固醇都吸附在活性炭上;仅在1β-³H-雄烯二酮的芳构化作用期间特定形成的³H-水保留于上清液中。由液体闪烁计数法来测量上清液中的放射性。同时,在乙二胺四乙酸盐溶液中进行细胞溶解作用。由标准荧光方法使用赫司特(Hoechst)33258荧光染料来测定DNA含量。最后,以每微克DNA每2小时所形成的³H-水的量(飞摩尔,fmole)来表示芳香酶活性,并将芳香酶抑制作用表示为无抑制剂条件下的对照活性的百分比。抑制作用百分比对抑制剂浓度的非线性拟合分析(GraphPadxa0Prismxa0Software)使得测定50%的抑制浓度(IC₅₀):最低的IC₅₀对应于最大效用的抑制剂(表1)。xa0b)类固醇硫酸酯酶活性JEG-3细胞系本质上富含人类雌酮硫酸酯酶,并因此是适用于活体外评估新类固醇硫酸酯酶抑制剂的生物系统。在96孔微板上用对数生长期的细胞来进行检验。研究前24小时,将细胞接种于经去补体胎牛血清(dFCS)补充的培养基中。24小时后移除所述培养基,并以PBS来清洗细胞以消除任何痕量dFCS。然后,将³H-E₁S添加到无dFCS的培养基中,然后添加浓度介于10^-12M到10^-5M之间的受试化合物。处理4小时后,将培养基转移到96深孔微板中并以200xg离心10分钟以在甲苯萃取之前成为小球(pellet)细胞。将一部分培养基用于甲苯萃取以便从未结合的产物中分离出已结合的底物。由液体闪烁计数法来测量甲苯相的放射性。同时,在将细胞溶解于乙二胺四乙酸xa0盐溶液中后,由标准荧光测定方法使用Hoechstxa033258荧光染料来测量DNA含量。最后,以每毫克DNA每4小时所形成的³H-E₁和³H-E₂的量(皮莫耳,pmole)来表示雌酮硫酸酯酶活性,并将雌酮硫酸酯酶抑制作用表示为无抑制剂的对照活性的百分比。抑制作用百分比对抑制剂浓度的非线性拟合分析(GraphPadxa0Prismxa0Software)使得测定50%的抑制浓度(IC₅₀):最低IC₅₀对应于最有效的抑制剂(表1)。xa0c)双重芳香酶和类固醇硫酸酯酶活性为了同时评估DASI化合物对人类芳香酶和类固醇硫酸酯酶活性的抑制能力,使用JEG-3细胞来建立新的活体外模型。以稍加修改采用先前描述的类固醇硫酸酯酶模型的实验条件:将两种底物³-HE₁S与1β-³H-雄烯二酮提供于培养基中和培育时间为2小时。结果表示为所形成产物的量(皮摩尔,³H-E₁+³H-E₂或³H₂O)/2小时/毫克DNA)(表1)。xa0d)碱性磷酸酶活性在研究前48小时将Ishikawa细胞涂于96孔微板中。第二天,用补充有5%活性炭吸附dFCS的无酚红培养基来替换所述培养基。24小时后,更新培养基并将化合物添加到所涂的细胞中,并再培育四天。对各化合物来说,所测试的浓度都介于10^-12M到10^-5xa0M之间,而且最终媒剂浓度不超过0.1%。在培育阶段结束时,通过将磷酸对硝基苯酯水解成对硝基苯酚和在405nm处对产物进行分光光度测定的方法来检验碱性磷酸酶(Apase)活性。xa0简单地说,首先用冷磷酸盐缓冲溶液将微板清洗两次,然后将其置于-80°C至少15分钟。在室温下解冻后,将含5mM磷酸对硝基苯酯的50μl冰冷溶液添加到各孔中。在室温下培育15到60分钟后,在405nm处测量各孔中因对硝基苯酚的生成而产生的黄色的强度。xa0对各测试浓度,由吸光度所反映的APase活性首先表示为相对于对照物的增加倍数(FI),然后表示为等于100%的所选E₂活性(10^-8M)的百分比。绘出S型剂量反应曲线(GraphPadxa0Prismxa0Software)并计算各化合物的50%有效浓度(EC₅₀)(表1)。xa0e)人类碳酸酐酶II活性如文献(Armstrongxa0J.等人的Purificationxa0andxa0propertiesxa0ofxa0humanxa0erythrocytecarbonicxa0anhydrases,Jxa0Biolxa0Chem,1966,241:5137-5149)中所述执行本检验。简单地说,在本检验中,人类碳酸酐酶II催化乙酸对硝基苯酯向对硝基苯酚的转化。通过对酶反应期间产生的对硝基苯酚进行比色测定来评估化合物的潜在抑制效应。将在无抑制剂的条件下获得的光学密度水平视为“总活性”。将无抑制剂和无酶的条件下获得的水平视为“空白”,以评估在检验期间对底物的任何干扰(表2)。xa0表1:芳香酶、雌酮硫酸酯酶和雌激素效能的抑制作用xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="552"/>A*:氨基磺酸、3-环庚基甲基苯并噻吩-6-基-1,1-二氧化物-酯(描述于WO2004/101545中)xa0nd:未检测xa0材料与方法:^a仅芳香酶活性;^b仅硫酸酯酶活性;^c双重芳香酶和硫酸酯酶活性,^dxa0雌激素效能。xa0在所测试的化合物中,实例43、实例45和实例46显示出人类雌酮硫酸酯酶活性的强抑制作用(IC₅₀约为10nM)。此外,相同化合物显示是芳香酶活性的强抑制剂(IC₅₀<1nM)。尽管具有双重活性,但它们不是活体外雌激素。xa0表2:人类碳酸酐酶II的抑制作用xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>实例45和实例51活体外抑制人类碳酸酐酶II。xa0活体内抗子宫增生/抗类固醇硫酸酯酶活性xa0切除Wistar雌性大鼠的卵巢并伎其休息4周。治疗前,由阴道涂片来检查循环缺失。经皮下以50微克/千克/天对动物单独补充硫酸雌酮(E₁S),或同时以1毫克/千克/天口服投与潜在的硫酸酯酶抑制剂,历时4天。将子宫移除,去除相邻组织并称湿重(表3)。xa0根据Purohit等人描述的方法加以细微修改来测量雌酮硫酸酯酶活性。简单地说,将子宫解冻、称重并匀浆化。用经葡聚糖涂覆的活性炭来处理上清液的等分试样并检验硫酸酯酶。在以5nM的³H-E₁S和20μM未标记的E₁S作为底物培育30分钟后,评估E₁S活性。将雌酮硫酸酯酶活性表示成pmol/h/mg蛋白,并报道为对E₁S的抑制百分比;对子宫重量来说,结果表示为由E₁S诱导的刺激的抑制百分比。xa0表3:子宫重量的抑制作用xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>由于硫酸酯酶抑制作用与子宫重量抑制作用之间存在直接线性关系(WO2004/101545),因此可推断出此子宫活性是由E₁S的显著抑制作用(>90%)造成的。实例45因发情力缺乏和显著的类固醇硫酸酯酶抑制作用而被选作雌酮硫酸酯酶活性的有效抑制劑。这些活体内结果与在JEG-3细胞中所获得的活体外结果相一致。xa0雌二醇峰值的抑制作用,如活体内芳香酶抑制模型xa0本实验的目的是测定在对雌性大鼠进行一次口服投药24小时之后,受试化合物与阿那曲唑相比对17β-雌二醇含量的剂量相关活性。阿那曲唑是芳香酶的有效非类固醇抑制劑,其在对雌性大鼠进行单次口服投药24小时后显著地将雌二醇含量抑制在3μg/kg。将一百只重180到200g的IOPSxa0Wistar雌性大鼠放入不锈钢网笼中,每笼4只。允许动物自由食用来自Harlanxa0Tekladxa02016球粒的标准饮食。每天早上为各动物进行阴道涂片以建立不同的循环期。从实验中排除掉不展现规则发情周期的大鼠。在下午4.00开始,使动物接收口服投与的配方。24小时后,如先前所述收集血清樣本并测定雌二醇含量(表4)。xa0表4:雌二醇峰值的抑制作用xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>实例45活体内抑制雌二醇峰值。xa0肿瘤生長的抑制作用xa0将MCF-7异种移植到裸小鼠中将从人类乳腺癌得到的MCF-7细胞经皮下注射到切除卵巢的无胸腺的经每天投与皮下硫酸雌酮来补充的裸小鼠中。每周测定异种移植物体积。当肿瘤体积达到显著增加时,持续8周以1毫克/千克/天口服投与受试化合物。根据用于大鼠子宫的方法,对异种移植物进行测量、移除、称重并深度冷冻以测定硫酸酯酶活性。xa0异种移植到裸大鼠中的ER+人类乳房肿瘤组织将从人类乳腺癌得到的MCF-7细胞(ATCC)经皮下注射到切除卵巢的无胸腺的经每天投与皮下雌二醇来补充的裸大鼠中。每周测定异种移植物体积。8周后,肿瘤体积达到1000mm³,其为各动物提供500mg雌激素反应组织样品。此时将各肿瘤切片并再移植到未经实验的切除卵巢的裸大鼠(Rnu/Rnu)中。然后,通过类固醇硫酸酯酶途径以作为雌二醇前躯体的硫酸雌酮来治疗动物。当肿瘤体积达到显著增加时,与安慰剂不同,将动物随机分成两组。将第一组用实例45治疗并补充有每天投与硫酸雌酮。第二组假装投与媒剂并补充有相同剂量的硫酸雌酮。持续5周以5毫克/千克/天口服投与实例45。每周用电子测径仪(Caliper)来测量异种移植物并与硫酸雌酮组作比较。(表5)。xa0表5:人类乳房肿瘤的抑制作用xa0ntent="drawing" img-format="tif" inline="no" orientation="portrait" wi="700"/>当用实例45来治疗动物时,肿瘤体积不再增加。同时另一方面,仅用硫酸雌酮(E₁S)治疗的组,肿瘤体积更大。实验结束时,在持续五周的每天治疗后,实例45导致肿瘤体积下降40%,其显示出清楚的和确实的抗癌效能。xa0将JEG-3异种移植到裸小鼠中JEG-3细胞系过度表达人类芳香酶和雌酮硫酸酯酶。将其经皮下注射到切除卵巢的无胸腺的经每天投与皮下硫酸雌酮来补充的裸小鼠中,而不管有无受试化合物(以5毫克/千克/天投药)。在此特殊情沉下,并根据其半液体状态(绒毛膜癌起源),与肿瘤测量是不相关的。然而,根据子宫重量获得主要由肿瘤组织合成的雌二醇的间接作用。另一方面,由于芳香酶和硫酸酯酶在这些肿瘤中的过度表达,因此酶含量可测量。根据上述方法来测定酶活性。xa0将JEG-3异种移植到补充有硫酸雌酮和△4-雄烯二酮的裸大鼠中在将JEG-3细胞注射到大鼠中的15天前,提取血样以测定雌二醇血浆的基础含量。然后将JEG-3细胞皮下注射到切除卵巢的无胸腺(Rnu/Rnu)裸大鼠中。以每天投与皮下硫酸雌酮和Δ4-雄烯二酮对裸大鼠进行补充,而不管有无受试化合物(以1毫克/千克/天投药)。21天后,在癌异种移植一天后和在实验结束时进行血液抽样。在本实验中,硫酸雌酮和Δ4-雄烯二酮是雌二醇的前驱体。雌二醇的作用反映在处死后的子宫重量上。实验结束时根据厂商的标准方法(DSL,Webster,TX,USA)检验血浆激素水平。xa0